probiotique
Résumé de l'arrière-plan
supplémentation probiotique peut réduire mutans streptocoques (MS) numéros. L'un de ses mécanismes proposés est immunomodulation. Salivaire neutrophile humaine peptide 1-3 (HNP1-3) niveaux ont déjà été démontré à être plus élevés libres caries que dans caries sensibles enfants, suggérant leur rôle préventif contre les caries. Nous avons cherché à comparer les niveaux de HNP1-3 salivaires entre un groupe d'intervention avec des probiotiques et un groupe témoin.
Méthodes
Un essai clinique randomisé en double aveugle a été menée. Soixante élèves ont été également attribuées soit à une intervention ou d'un groupe de contrôle. L'utilisation d'une souche probiotique, SD1 de Lactobacillus paracasei, a montré pour réduire le nombre de SEP chez des volontaires. Dans l'ensemble de la salive non stimulée, les niveaux HNP1-3 ont été dosés par ELISA et MS et le nombre de lactobacilles ont été analysés par comptage des colonies au départ (T0) et à 3 (T3), 6 (T6) et 12 mois (T12). Résultats du système de détection et d'évaluation Caries international a été utilisé pour évaluer l'état des caries.
Dans le groupe d'intervention, salivaires HNP1-3 niveaux étaient significativement plus élevés que ceux du groupe témoin au T3 et T6 (p & lt
0,001), alors que les chiffres MS ont été significativement diminué (p
& lt; 0,01). Dans le groupe d'intervention, les corrélations positives et négatives ont été trouvées entre HNP1-3 niveaux et compte lactobacilles et entre MS et compte lactobacilles, respectivement. Cependant, il n'y avait pas de corrélation significative entre les niveaux de HNP1-3 améliorés et une diminution du nombre de SP. Les conclusions de l'augmentation des caries de la surface de puits et fissures, mais pas pour les surfaces lisses, a été significativement diminué dans le groupe d'intervention par rapport au groupe témoin (p = 0,01
).
Probiotiques peuvent temporairement améliorer salivaire niveaux HNP1-3; L'enregistrement de première instance de cependant, leur action visant à réduire les nouveaux puits et fissures caries implique probablement des interactions microbiennes
TCTR20130904001.. (date d'inscription: Septembre 04, 2013)
Mots-clés
caries dentaires Alpha-défensines streptocoques mutans Probiotiques matériel supplémentaire Saliva électronique
La version en ligne de cet article (doi:. 10 1186 /s12903-015-0003-0) contient du matériel supplémentaire, qui est disponible pour les utilisateurs autorisés
Contexte
caries dentaires. est l'une des maladies les plus répandues chez les enfants et les adultes dans le monde [1]. Cependant, le succès de tous les programmes de prévention des caries a été entravée par sa nature multifactorielle. La maladie est le résultat de la déminéralisation, causée par les interactions des bactéries cariogènes, une alimentation riche en glucides fermentescibles, et des composants d'accueil, tels que des dents et de salive propriétés [2]. Bien que de nombreuses espèces bactériennes peuvent jouer un rôle dans le processus de la carie [3], streptocoques mutans (MS) ont été considérés comme des agents pathogènes majeurs associés au développement précoce de la carie [4]. Les principales propriétés de virulence de la SEP sont acidogénicité, la tolérance de l'acide, la formation de biofilm et la dent adhérence [5]. Une forte association entre les quantités MS et la pathogenèse de la carie dentaire est démontrée par plusieurs études antérieures, examinées dans [6].
Administration probiotique est considérée comme une stratégie potentielle pour améliorer ou maintenir la santé bucco-dentaire. Selon l'Organisation mondiale de la santé (OMS), les probiotiques sont des «micro-organismes vivants qui, lorsqu'ils sont administrés en quantités adéquates, confèrent un avantage pour la santé de l'hôte» [7]. Plusieurs mécanismes ont été proposés pour l'action probiotique, y compris la production de substances antimicrobiennes, la concurrence avec des agents pathogènes en empêchant l'adhérence et l'invasion cellulaire et la modulation des fonctions immunitaires locales et systémiques [8-11]. Dans une récente revue systématique [12], plusieurs essais cliniques ont montré la capacité de la supplémentation en probiotiques pour réduire les chiffres MS, mais l'effet de diminution est variable et de courte durée. Par ailleurs, que très peu d'études ont jusqu'à présent étudié les quantités de lactobacilles (LB) et la prévention de la carie nouvelle occurrence par la supplémentation en probiotiques.
Bien que LB, couramment utilisés comme probiotiques, ont été associés à la progression de la carie [13], un étude récente a révélé que seule une certaine espèce, à savoir
, Lactobacillus salivarius
, est plus liée au développement de la carie par sa capacité à produire des niveaux élevés d'acides [14]. Contrairement à ces bactéries cariogènes, Lactobacillus paracasei
isolé des sujets sans carie possède une capacité à inhiber la croissance MS [15,16]. Dans cette étude, SD1 de Lactobacillus paracasei a été présenté comme une souche probiotique et utilisé dans la cavité buccale en raison de ses différentes propriétés précédemment démontré, y compris l'inhibition de la croissance MS, la production moins acide que les autres LB, et une bonne adhérence à l'épithélium oral cellules [17].
neutrophiles Human peptides 1-3 (HNP1-3) sont de petits peptides antimicrobiens cationiques qui fournissent la première ligne de défense de l'hôte contre un large spectre de micro-organismes [18]. HNP1-3 sont exprimés dans les cellules épithéliales canalaires des glandes salivaires sous-maxillaires et sécrétée dans la salive [19]. Elles sont également produites par les neutrophiles et libérés dans le fluide gingival [20]. Le rôle préventif de HNP1-3 contre la carie dentaire a été suggérée par les niveaux de HNP1-3 salivaires significativement plus élevés dans enfants sans carie que dans les caries en situation démontrée par Tao et al. [19]. Puisque l'un des mécanismes de probiotiques a été proposé d'être impliqué dans la régulation immunitaire de l'hôte, nous, par conséquent, l'hypothèse que la supplémentation en probiotiques peut aider à prévenir la carie dentaire par l'augmentation de l'immunité de l'hôte local via une production accrue de salive HNP1-3. Les objectifs de cette étude étaient d'examiner les effets de l'intervention des probiotiques sur les niveaux salivaires de HNP1-3, compte MS, et compte LB, et de déterminer les corrélations entre ces paramètres host et microbiens. En outre, de nouvelles occurrences de lésions carieuses pour les deuxièmes molaires permanentes au cours d'un essai clinique de 12 mois ont été évalués et comparés entre les groupes de contrôle et d'intervention.
Méthodes
Vue d'ensemble de la conception de l'étude
Cet essai a été conçu comme un randomisée, en double aveugle et contrôlée par placebo méthode avec deux groupes parallèles. Le protocole d'étude a été approuvé par les comités des Expérimentation des facultés de médecine dentaire, Université de Chiang Mai et Prince of Songkla University, Thaïlande. Le consentement éclairé a été obtenu à partir des parents ou tuteurs de chaque participant avant le début de cette étude. Soixante participants admissibles et en bonne santé sur 246 enfants ont été répartis à parts égales à l'un des deux groupes, le contrôle et les groupes probiotiques, en utilisant une procédure de randomisation simple, au moyen d'un tirage au sort (Figure 1). Les critères d'inclusion et d'exclusion sont identifiés chez les participants et à la figure 1. Pour la méthode en double aveugle, le code a été maintenu par un observateur indépendant. Ce code n'a pas été dévoilé jusqu'à ce que toutes les données ont été analysées. Aucun des chercheurs, les cliniciens, les participants, les enseignants, ou le statisticien savait si les enfants ont reçu le contrôle ou le lait d'intervention pendant toute la durée de cette étude. Le procès a été enregistré au http: //www. ClinicalTrials dans e /, l'un de l'OMS primaire Réseaux du Registre, Essais cliniques identifiant TCTR20130904001... Toute la période expérimentale a duré 12 mois, et la mesure des résultats de cette étude se composait de quatre paramètres: HNP1-3 salivaire, MS et LB niveaux à quatre points de temps différents: T0 (ligne de base), T3 (trois mois d'intervention), T6 (six mois d'intervention) et T12 (six mois après l'arrêt de l'intervention), et la présence de lésions carieuses ou déminéralisé à T0 et T12 (Figure 1). Le calcul de la taille
échantillon a priori a été réalisée avec un accent sur les différences moyennes de MS dénombre entre deux groupes indépendants en utilisant le logiciel G Puissance [21], avec la taille de l'effet égal à 0,8 à 5% le niveau de signification statistique et 90% de la puissance de l'essai . Le calcul a donné pas moins de 28 participants dans chaque groupe. Figure 1 Un organigramme consort montrant le nombre de participants dans le contrôle et les groupes probiotiques au début et à la fin du procès. Sur 246 enfants inscrits dans ce procès, 60 participants sont restés admissibles en raison des critères d'inclusion et d'exclusion. Soixante participants ont été également affectés soit le contrôle ou le groupe probiotique par simple randomisation décrit dans les méthodes. Les participants ont reçu du lait en poudre avec ou sans probiotiques lors de la première intervention de six mois, et des échantillons de salive ont été prélevés pour des analyses des niveaux HNP1-3, MS et LB Chiffres à quatre points de temps différents: T0, T3, T6 et T12. Examen oral pour l'évaluation des scores ICDAS a été réalisée à T0 et préparation de T12. poudre de lait additionné de probiotiques
La souche probiotique, SD1 de Lactobacillus paracasei, a été isolé à partir sans carie volontaires et a été montré précédemment pour exercer l'effet inhibiteur maximal sur Streptococcus mutans in vitro
[17]. La souche bactérienne a été identifiée par PCR-RFLP du gène 16S de l'ARN ribosomique et le sodium dodécyl électrophorèse sur gel de Polyacrylamide [22]. L'intervention probiotique a été fabriqué dans une forme de lait en poudre par la technique de séchage par atomisation. Les conditions de culture et la technique de séchage par pulvérisation ont été effectuées comme décrit précédemment [23]. En bref, une culture de Lactobacillus paracasei SD1 a été inoculé dans un mélange de 1% de probiotiques et d'une quantité de 3 litres traité thermiquement (50 ° C pendant 30 min) et 20% de lait écrémé reconstitué, puis séchée par pulvérisation avec un sécheur à pulvérisation (modèle B191 Buchi sèche mini pulvérisation; Flawil, Suisse). Le produit final est une poudre blanche jaunâtre avec des teneurs en humidité de 3,44 ± 0,85% et les numérations viables de 7,5 ± 0.20x10
8 ufc /g, qui a été stocké à 4 ° C. La viabilité de SD1 de Lactobacillus paracasei dans le lait en poudre inoculée a déjà été évaluée dans une étude de six mois en examinant sa croissance en triple Man Rogosa et Sharpe (MRS) verser des plaques sous incubation anaérobie pendant trois jours à 37 ° C [23 ]. Il a été démontré que le taux de survie au maximum SD1 Lactobacillus paracasei dans le lait écrémé en poudre était de 99% lorsque le lait en poudre a été stocké à 4 ° C pendant six mois [23]. Cependant, le taux de survie a fortement diminué si le lait en poudre a été conservé à 25 ° C [23]. La poudre de lait dans l'apparence générale pour les deux groupes de probiotiques et de contrôle avait l'air identique, à l'exception de l'absence de la souche probiotique dans le groupe témoin, et a été emballé dans les mêmes sacs de plastique transparents marqués avec un nom de chaque participant. Les étapes de conditionnement et de distribution ont été effectuées par un assistant de recherche qui a été aveuglé de chaque étape de l'échantillonnage et l'analyse
participants
Les critères d'inclusion étaient:. (I) une bonne santé bucco-dentaire à la carie en deux ou moins de dents (ii) présence de quatre deuxièmes molaires dans la bouche (iii) l'absence de lésions carieuses profondes actifs non traitées (iv) l'absence de parodontite (v) non-fumeur et (vi) dent brossage quotidien habitude en utilisant un dentifrice au fluorure. Les critères d'exclusion étaient des adolescents atteints de maladies systémiques, recevant des antibiotiques systémiques dans les six semaines, la consommation courante de probiotiques ou le xylitol, l'allergie au lait de vache, intolérance au lactose et allergie alimentaire sévère. Avant le début de l'essai clinique, tous les participants ont été informés de ne pas consommer des produits contenant des probiotiques, tels que le yaourt, yaourt à boire, fromage, etc., pendant toute la durée de ce procès. Les participants des deux groupes ont été chargés de mélanger 5 g de lait en poudre dans 50 ml d'eau et boire une fois par jour, sauf les jours de collecte de salive, pendant six mois sous la supervision d'instructeurs. Sur les vacances ou les week-ends, tous les enfants ont été informés de boire leur lait à la maison et de retourner les sacs en plastique vides. La conformité a été vérifiée par leurs enseignants qui ont rempli un journal de bord chaque jour avec des informations sur la fréquentation scolaire des enfants et si oui ou non les enfants avaient bu le lait. Il était évident que pas d'enfants participant à cette étude étaient absents de leurs classes en raison de congés de maladie au cours de la première intervention de six mois. On a demandé à tous les participants de signaler immédiatement tous les effets secondaires.
Les analyses des niveaux de HNP1-3 salivaires
Une quantité de 2 ml de l'ensemble de la salive non stimulée a été recueillie et également divisé en deux aliquotes, l'une pour l'analyse des niveaux HNP1-3 et l'autre pour l'analyse des niveaux microbiologiques. La première aliquote a été ajouté avec Nonidet P-40 (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO) à la concentration finale de 0,1% (v /v), centrifugées à 15 000 tpm à 4 ° C pendant 10 min [19], et le surnageant clarifié a été recueilli et stocké congelé pour une analyse plus approfondie des niveaux HNP1-3 par un kit ELISA HNP1-3 (Hycult Biotechnology, Uden, Pays-Bas) selon les instructions du fabricant. En bref, des échantillons de salive dilué (1: 200) ont été appliqués sur une plaque pré-enduite en triple exemplaire avec l'anticorps primaire spécifique à HNP1-3 et incubées pendant 1 h à température ambiante. Pour un témoin négatif, un tampon de dilution, sans addition des échantillons de salive a été ajouté à la plaque pré-enduite. Après quatre lavages avec du tampon de lavage, chaque puits a été incubé avec l'anticorps traceur biotinylé pendant 1 h à température ambiante. Puis, le conjugué streptavidine-peroxydase a été ajouté et incubé pendant 1 h. Après cela, 3,3 ', 5,5'-tétraméthylbenzidine, un substrat chromogène, on a ajouté pendant 20 min, et la réaction a ensuite été stoppée par l'addition d'acide oxalique à 2%. Les concentrations de HNP1-3 dans des échantillons de salive ont été calculées à partir d'une courbe étalon établie par différentes concentrations connues d'un étalon HNP1-3, utilisé en tant que contrôle du système ELISA. Les concentrations de salivaire HNP1-3 ont ensuite été normalisées par leur teneur en protéines totales en utilisant un dosage de protéines BCA (Pierce Inc., Rockford, IL) selon les instructions du fabricant.
Analyses microbiologiques
Les quantités de salive MS et LB ont été évalués par une méthode typique des colonies de comptage à T0, T3, T6 et T12. La seconde partie aliquote des échantillons de salive a été diluée dix fois de 1:10 à 1: 10.000. Chaque dilution (10 pi) a été déposé sur les plaques d'agar sélectives, Salivarius Bacitracine Mitis (MSB) agar pour MS (Difco Laboratories, Detroit, MI) et gélose MRS pour LB (Difco Laboratories). Les conditions d'incubation étaient anaérobie, 10% H 2, 10% de CO 2 et 80% N 2 à 37 ° C pendant 48 h. Le comptage des colonies a été réalisée sous un microscope en double exemplaire.
Détection international Caries et système d'évaluation (ICDAS)
Au début et à la fin de cette étude (T0 et T12), tous les participants ont été examinés pour la santé bucco-dentaire caries statut par deux dentistes expérimentés (SP et ST) avec des valeurs kappa de Cohen 0,85 et 0,82 pour les étalonnages intra- et inter-examinateur, respectivement. L'examen a été effectué en utilisant un miroir de la bouche et une seringue à air sous une lumière d'exploitation. Les données de caries pour chaque surface de la dent, y compris occlusal (puits et fissures) et une surface lisse (buccale, linguale, mésiale et distale) caries, ont été enregistrées selon les critères de la détection internationale Caries et système d'évaluation (ICDAS) [24]. Les codes de ICDAS se composent de: 0 = son, 1 = premier changement visuel en émail, 2 = changement visuel distinct en émail, 3 = répartition de l'émail localisé, 4 = sous-jacente ombre dentine, 5 = cavité distincte avec la dentine visible, et 6 = étendue cavité à l'intérieur de la dentine visible. Caries évaluation des risques dans cette étude a été déterminée par les critères modifiés décrits précédemment par Nase et collègues de travail [25], qui comprennent à la fois l'état clinique des caries et des quantités MS comme suit. Les participants «à haut risque» ont été définis comme ayant à la fois un score de ICDAS & gt; 0 et niveaux MS ≥10 5 ufc /ml, alors que ceux "à risque modéré» avaient soit marquer un ICDAS & gt; 0 ou MS niveaux ≥10 5 ufc /ml et ceux «à faible risque» avaient un score de ICDAS = 0 et MS niveaux & lt; 10 5 ufc /ml analyse statistique de The Mann-Whitney U
. test a été utilisé pour analyser les différences entre les groupes dans les niveaux de HNP1-3 salivaires. Les différences dans les niveaux de HNP1-3 salivaires entre quatre périodes différentes dans chaque groupe ont été analysées par le test de Kruskal-Wallis, suivie par le test de Mann-Whitney U. Le nombre de comptes de colonies pour MS et que, pour LB ont été présentés comme log ufc /ml et analysé par l'échantillon indépendant t
-test. Corrélations entre chaque paire de données de niveaux HNP1-3, MS et LB chiffres dans chaque groupe ont été testés par le test de corrélation de Pearson. L'analyse de régression a été réalisée pour les données de corrélation significative. Un rapport de cotes (OR) pour caries minimum a été calculé en Crosstabulation. Le logiciel utilisé est le progiciel de statistiques pour les sciences sociales (SPSS, version 17.0 Inc., Chicago, IL), et les différences ont été considérées comme significatives lorsque p
-values étaient inférieures à 0,05. . Les résultats de toutes ces méthodes statistiques ont été effectuées par un biostatisticien (TS)
données démographiques
Un total de 60 participants (âge varie 13-15 ans; n = 26
pour les hommes et 34 pour femelles) terminé cet essai clinique de 12 mois (Figure 1). Pas d'effets secondaires indésirables de probiotiques ou de lait en poudre apport de cette cohorte ont été signalés. La conformité à la consommation quotidienne de lait en poudre dans les deux groupes a été soigneusement contrôlée sous la supervision des enseignants et bien contrôlé tout au long de la première période d'intervention de six mois. L'évaluation de risque carieux a révélé que les pourcentages de participants classés dans le «haut risque», le «risque modéré» et les groupes «à faible risque» étaient 50, 31,7 et 18,3, respectivement. Bien que la procédure randomisée a été réalisée pour allouer les 60 participants éligibles au contrôle ou à un groupe probiotique, il a coïncidé que les pourcentages de caries élevé, modéré et faible risque dans le contrôle par rapport au groupe probiotique étaient presque égales comme suit: 50,0 contre 50,0, 33,3 contre 30,0 et 16,7 par rapport à 20,0, respectivement.
salivaire Raised HNP1-3 niveaux dans le groupe probiotique
les niveaux salivaire HNP1-3 médians, exprimé dans l'unité de pg /mg de protéines totales, dans le probiotique groupe étaient significativement plus élevés que ceux dans le groupe de contrôle au T3 (1,0250 contre 0,5145 pg /mg; p
& lt; 0,001) et T6 (1,1470 contre 0,5415 pg /mg; p
& lt; 0,001), mais pas à ou T0 T12 (Figure 2). En ce qui concerne la cinétique de niveaux de HNP1-3 salivaires dans le groupe probiotique pendant la période de cet essai clinique de 12 mois, il a été démontré que les niveaux HNP1-3 ont été temporairement élevés au cours de la période d'intervention de six mois (Figure 2). En d'autres termes, ces niveaux ont augmenté significativement au T3 et T6 (p
& lt; 0,001) et progressivement diminué à T12. Toutefois, aucun changement significatif dans les niveaux de HNP1-3 salivaires dans le groupe de contrôle à quatre points de temps (T0, T3, T6 et T12) ont été observées (Figure 2). Figure 2 Augmentation significative mais transitoire salivaire peptide neutrophile humaine (HNP) 1-3 niveaux de supplémentation en probiotiques. Le y
-axis du graphe boîte de tracé montre les niveaux salivaires de HNP1-3 normalisées par concentration totale en protéines dans l'unité de pg /mg pour le contrôle (boîtes vides) et les probiotiques (boîtes grises) des groupes de quatre périodes différentes de la salive collection: T0, T3, T6 et T12. * = P
& lt; 0,05; *** = P
& lt; 0,001. Les lignes pleines montrent les différences significatives entre les deux groupes, tandis que les lignes en pointillés représentent les différences importantes au sein du groupe probiotique.
Diminué MS compte par opposition à une augmentation de chiffres LB par intervention probiotique
Les chiffres moyennes et les erreurs types pour salivaire MS et LB (log ufc /ml) à T0, T3, T6 et T12 dans le contrôle et les groupes probiotiques sont démontrés dans un graphique linéaire (Figure 3). Au départ (T0), il a été démontré que le nombre moyen salivaire LB dans le groupe probiotique (trait plein) n'a pas été significativement différente de celle du groupe témoin (trait en pointillé), tandis que la moyenne salivaire MS compter dans le groupe probiotique était significativement plus élevée que dans le groupe témoin (p
& lt; 0,05; figure 3). Cependant, au T3 et T6, une réduction significative de MS compte dans le groupe probiotique était clairement évidente par rapport à ceux du groupe de contrôle (T3 = p
& lt; 0,001 et T6 = p
& lt; 0,01), alors qu'une augmentation significative du nombre de LB a été observée à la place (p
& lt; 0,05; figure 3). Par contraste avec le groupe probiotique, aucun changement significatif de la moyenne des comptages pour salivaire MS et LB ont été trouvés dans le groupe témoin (lignes en pointillés sur la figure 3). T12, le comptage moyen pour salivaire MS dans le groupe probiotique a été augmentée et est retourné à peu près à la valeur de référence, tandis que le comptage moyen pour salivaire LB dans le groupe probiotique était encore significativement plus élevé que celui du groupe témoin (p
& lt; 0,01; figure 3), ce qui suggère la possibilité de LB pour être retenu dans la cavité buccale, en dépit de la cessation de l'intervention probiotique pendant six mois. Figure 3 Réduction significative mais transitoire mutans salivaires streptocoques (MS) compte par l'intervention probiotique. Le graphique linéaire illustre signifie log chiffres de MS (cercles ouverts) et ceux de lactobacilles (LB; cercles noirs) dans l'unité de ufc /ml (y
-axis) dans les deux probiotique (lignes pleines) et de contrôle (lignes en pointillés ) des groupes de quatre périodes différentes de collecte de salive (x
-axis): T0, T3, T6 et T12. * = P
& lt; 0,05; ** = P
& lt; 0,01; *** = P
& lt; 0,001. Les barres d'erreur représentent les erreurs standard (SE). Les valeurs de moyenne log MS et LB compte et (SE) sont indiqués dans les boîtes solides pour le groupe probiotique et dans les cases en pointillés pour le groupe de contrôle dans chaque période de collecte de salive.
Réduction significative des caries incrémenter pour la fosse et surface de fissure dans le groupe probiotique
les pourcentages de son (ICDAS score = 0) et les surfaces malsaines (ICDAS scores = 1-6) de tous les cinq surfaces dentaires, y compris les puits et fissures, mésiale, distale, buccale et linguale, à T0 et T12 à la fois des groupes de contrôle et de probiotiques sont illustrés sous forme de barres à un total de 100% (figure 4A). Il était évident que les pourcentages de lésions carieuses dans les deuxièmes molaires permanentes dans des groupes à la fois de contrôle et de probiotiques a augmenté dans presque toutes les surfaces des dents au cours de cette étude de 12 mois et que les puits et fissures des caries dans les deux groupes était plus répandue dans notre cohorte que ce qui était caries dans les quatre autres surfaces lisses, y compris mésiale, distale, buccale et linguale (figure 4A). Les sommes des pourcentages de caries incrémenter pour les cinq surfaces dentaires, y compris la fosse et la surface de la fissure et de quatre surfaces lisses, et pour quatre surfaces lisses dans le groupe probiotique par rapport au groupe témoin étaient 25,5 contre 44,2 et 15,2 par rapport à 21,4, respectivement (figure 4B ). Les pourcentages de caries incrémenter seulement dans la surface de puits et fissures étaient 10,3 contre 22,8 (figure 4B). Fait intéressant, le pourcentage de nouvelles caries occurrence pour les cinq surfaces des dents (OR = 1,605; IC à 95% de 1,007 à 2,557; p = 0,045
) et pour la surface de puits et fissures (OR = 2,582; IC à 95% 1,235 à 5,400 ; p
= 0,01) était significativement plus faible dans le groupe probiotique que dans le groupe témoin, alors qu'il n'y avait pas de différence significative dans la nouvelle carie survenue entre deux groupes pour les quatre surfaces lisses (OR = 1,506; IC à 95% 0.726- 3.126; p = 0,269
). Figure 4 Diminution significative du pourcentage de caries incrémenter pour la surface de puits et fissures, mais pas pour les surfaces lisses, par une intervention probiotique. (A) Les barres empilées 100% montrent les pourcentages de son (zone blanche; ICDAS note = 0) et malsaines (zones remplies; scores ICDAS = 1-6) surfaces de tous les cinq surfaces des dents, y compris les puits et fissures, mésiale, distale , buccale et linguale, dans le contrôle (panneau supérieur) et les (panneau inférieur) probiotiques. Remarque des pourcentages plus élevés de surfaces malsaines dans la surface de puits et fissures que ceux des quatre autres surfaces. (B) Le graphique à barres révèle une réduction significative du pourcentage de caries incrémenter dans le groupe probiotique pour une combinaison de tous les cinq surfaces dentaires et pour la surface de puits et fissures seul, mais pas pour les combinés quatre surfaces lisses, y compris mésiale, distale, vestibulaire et linguale. * = P
& lt; 0,05; ** = P = 0,01
.
Le manque de corrélation entre les niveaux accrus de HNP1-3 et le nombre de MS de Corrélations diminué entre chaque paire de salivaire HNP1-3 niveaux en pg /mg de protéine totale, MS chiffres et compte LB en log ufc /ml dans les deux groupes témoins et probiotiques ont été déterminées par le test de corrélation de Pearson (voir le fichier additionnel 1 pour les données de chaque paramètre), et il a été révélé que des corrélations significatives entre ces paramètres ne se trouvaient que dans la un groupe probiotique, mais pas dans le groupe témoin (figure 5). En particulier, les niveaux salivaires HNP1-3 étaient positivement corrélés avec les chiffres LB (r = 0,376
; p
& lt; 0,001; la figure 5B) avec l'équation de l'analyse de régression: y =
0.653x
+ 5,929, où y
est le compte journal de LB et x
est le niveau de HNP1-3, alors que les chiffres LB étaient inversement associés à chiffres MS (r = -0,282
; p = 0,002
; La figure 5F). Néanmoins, aucune corrélation significative n'a été notée entre salivaire HNP1-3 niveaux et MS compte dans le groupe probiotique (Figure 5D), ce qui suggère que l'amélioration des niveaux salivaires HNP1-3 par l'intervention des probiotiques ne sont pas associés à une diminution des quantités de SP. Figure 5 corrélations positives et négatives entre salivaire neutrophile humaine peptide (HNP) 1-3 niveaux et connectez-vous compte de lactobacilles (LB) et entre le nombre de journaux de streptocoques mutans (MS) et ceux de LB, respectivement, dans le groupe probiotique. Les coefficients de corrélation (r
) et les niveaux de signification (p
-values) entre chaque paire de trois paramètres, y compris HNP1-3 niveaux en pg /mg, LB compte dans log ufc /ml et MS compte dans log cfu /ml ont été déterminées et représentées pour les deux interrupteurs (A, C et E) et probiotique (B, D et F) des groupes. L'analyse de régression pourrait être déterminée que pour la corrélation significative entre les niveaux HNP1-3 a augmenté et augmenté LB compte dans B, et une ligne de régression a été dessinée avec l'équation: y =
0.653x
+ 5,929; p
= Rapport
Les principales conclusions de cette étude 0.003 de comprendre (a) une augmentation significative mais temporaire salivaire HNP1-3 niveaux au T3 et T6 dans le groupe probiotique. (B) une augmentation significative du nombre LB par opposition à une diminution transitoire de la MS compte lors de l'intervention des probiotiques; (C) des corrélations positives et négatives constatées entre les niveaux HNP1-3 et compte LB et entre les comptages LB et MS compte, respectivement, dans le groupe probiotique; et (d) une réduction significative des caries incrémenter pour la surface de puits et fissures, pas pour les surfaces lisses. Parmi ces quatre principales conclusions, l'augmentation significative des niveaux de HNP1-3 salivaires par la supplémentation en probiotiques pendant la période d'intervention de six mois est d'un grand intérêt, car il est probable que SD1 de Lactobacillus paracasei peut exercer un effet immunostimulant par une production accrue de innée effecteurs immunitaires, en particulier HNP1-3, des cellules épithéliales des canaux salivaires sous-maxillaires de glandes [19], qui sont ensuite sécrétées dans la salive. Le possible effet immunostimulant de Lactobacillus paracasei
mandats SD1 investigations complémentaires. En outre, l'activation du système immunitaire inné SD1 par Lactobacillus paracasei est corroboré par la corrélation significative entre les taux salivaire de HNP1-3 élevées et augmentation de la numération LB vu dans la figure 5B. L'activation de l'immunité de l'hôte, en particulier une production accrue de l'immunoglobuline A sécrétoire (slgA), a été précédemment démontré que l'un des principaux mécanismes de probiotiques dans le tractus gastro-intestinal [26-28] et dans la cavité buccale [29-31]. Dans cette étude, la raison d'être d'enquêter seulement salivaires HNP1-3 niveaux au cours de l'intervention probiotique a été basée sur l'observation d'une seule étude précédente qui a démontré beaucoup plus élevés HNP1-3 niveaux dans les échantillons de salive de enfants sans carie que ceux des caries- enfants sensibles [19]. Cependant, il est nécessaire de déterminer davantage les niveaux d'autres molécules effectrices liées au système immunitaire, en particulier d'autres peptides antimicrobiens outre HNP1-3, salivaires dans une étude future. Il est à noter que les niveaux de salivaire HNP1-3 détectés dans notre cohorte ont été comparables à ceux mesurés par la même méthode ELISA effectué par Tao et ses collaborateurs [19]. Fait intéressant, les niveaux HNP1-3 ont été temporairement élevés au cours de la période d'intervention de six mois et a progressivement diminué au niveau de référence après l'arrêt de la consommation de probiotiques. L'induction temporaire des niveaux HNP1-3 est en ligne avec l'induction transitoire des niveaux slgA dans la salive par l'ingestion de probiotiques [30], ce qui indique que la consommation quotidienne de probiotiques semble être nécessaire pour une augmentation durable dans les réponses immunitaires de l'hôte.
Néanmoins , les levés salivaire HNP1-3 niveaux ne sont pas corrélés de manière significative avec les chiffres MS ont diminué, mais les chiffres LB ont été corrélées à la place inversement avec le MS compte, ce qui suggère que le mécanisme d'action des probiotiques dans la cavité buccale peut probablement impliquer la concurrence et /ou l'interaction entre les deux microorganismes distincts, comme indiqué précédemment par Teanpaisan et Piwat [22] au lieu d'une production accrue de HNP1-3.
