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Réaction du rat tissu conjonctif à agrégat de trioxyde minéral et diaket

 

Résumé de l'arrière-plan
Le but de cette étude était de comparer la réaction du rat tissu conjonctif à des matériaux de remplissage de deux racines de gamme: blanc Mineral Trioxyde Aggregate ( Méthodes de WMTA) et Diaket.
Chacune des matières a été placé dans des tubes de dentine et implanté par voie sous- cutanée dans la partie dorsale du tissu conjonctif de 21 rats Wistar albinos. Des biopsies de tissus ont été collectés 7, 30 et 60 jours après la procédure d'implantation. Les échantillons ont été traités et colorés avec de l'hématoxyline et de l'éosine et examinées au microscope. Après avoir déterminé le nombre de cellules inflammatoires dans les sections de chaque échantillon, les résultats de la réaction inflammatoire ont été définis comme suit: 0; peu ou pas de cellules inflammatoires (pas de réaction), 1; moins de 25 cellules (réaction légère), 2; 25 à 125 cellules, (réaction modérée), et 3; 125 ou plusieurs cellules (réaction grave). Résultats de l'analyse statistique a été effectuée en utilisant les tests de Kruskal-Wallis et Mann-Whitney.
Il y avait des différences statistiquement significatives dans le nombre de cellules inflammatoires médianes tout au long des trois périodes d'essai, avec le degré le plus grave de l'inflammation observée à celle période -Week. Peu de cas de nécrose ont été observés avec WMTA. Diaket présentait le degré le plus grave de l'inflammation et de nécrose. Après 30 jours, les deux matériaux ont provoqué une réaction inflammatoire modérée. La période de huit semaines a montré le degré d'inflammation moins sévère dans tous les groupes. Conclusions de
Il a été conclu que WMTA présente une réponse tissulaire plus favorable par rapport à Diaket qui a induit une réaction inflammatoire plus sévère que WMTA et le contrôle.
matériel électronique supplémentaire
La version en ligne de cet article (doi:. 10 1186 /1472-6831-11-17) contient du matériel supplémentaire, qui est disponible pour les utilisateurs autorisés
Contexte
A. intervention chirurgicale périapicale implique habituellement la résection apicale, la préparation et le scellement, en utilisant un matériau de remplissage apicale. Le succès de la chirurgie peut dépendre de la capacité d'étanchéité du matériau de remplissage de racine d'extrémité pour empêcher la pénétration de bactéries ou de leurs sous-produits, ainsi que sur sa capacité à fournir un environnement favorable pour la régénération et la guérison des tissus périradiculaires [1, 2 trioxyde minéral le total de]. (MTA) a été développé en tant que matériau de remplissage racine-end à Loma Linda University, Californie, États-Unis [1]. Les principaux composés dans ce matériau sont le silicate tricalcique, aluminate tricalcique, l'oxyde de tricalcium et de l'oxyde de silicate [2]. In vivo et in vitro

études favorables à l'utilisation potentielle de ce document en tant que matériau de remplissage racine-end [3-5]. Des recherches antérieures ont également démontré la capacité du MTA à encourager le dépôt des tissus durs [3, 6, 7], et sa bonne capacité d'étanchéité par rapport à d'autres matériaux [3, 8-10]. De plus, MTA a été trouvé pour être bien toléré et biocompatible [11-17], et a révélé une réponse de tissu périapical plus favorable par rapport à l'amalgame, IRM, et Super EBA [4, 5, 18] de. Diaket est un chélate de calcium renforcés par une résine vinylique [19]. Il a été initialement formulée sous forme d'un agent de scellement de canal radiculaire, lorsqu'il est mélangé à une poudre rapport liquide de 1: 1. Tetsch, en 1986, le premier documenté l'utilisation de Diaket en tant que matériau de remplissage de racine extrémité lorsqu'elle est mélangée à une consistance plus épaisse [20]. Diaket démontré des propriétés acceptables [21-23]. Il a démontré une étanchéité supérieure par rapport à l'amalgame [23], un potentiel de guérison favorable chez le chien [22] et une réponse de cicatrisation mieux par rapport à la gutta-percha [24].
Deux Diaket et MTA se sont révélés favoriser la régénération tissulaire périradiculaire . . Cependant, les propriétés de manipulation de Diaket ont été considérés comme supérieurs à ceux de MTA [21]
Le but de la présente étude était de comparer la réaction du rat tissu conjonctif aux matériaux de remplissage de deux racines de gamme: blanc Trioxide Mineral Aggregate (WMTA) et méthodes de Vingt et un mâle de Diaket., 5-6 mois vieux rats Wistar albinos pesant 350 ± 50 g ont été utilisés. Animal care a été effectuée selon le Comité soin et l'utilisation des animaux institutionnels et le Conseil canadien de protection des animaux [25, 26]. Le protocole a été approuvé par l'Université jordanienne des sciences et de la technologie Décanat de la recherche, et l'Université de protection des animaux et l'utilisation Comité. Les groupes suivants ont été étudiés:
Groupe 1:. Groupe de contrôle (tubes de dentine vides)
Groupe 2: Blanc Mineral Trioxyde Aggregate (Dentsply, Tulsa Dental, Tulsa, OK, USA)
Groupe 3:. Diaket , les tubes de dentine de (3 M ESPE AG, Seefeld, Bayern, Allemagne). ont été préparés à partir de racines des dents humaines de simples dents enracinées à une longueur de 7 mm. Les canaux ont été agrandis en utilisant ProTaper fichiers (Dentsply Maillefer, Ballaigues, Suisse) et Gates Glidden (Dentsply Maillefer, Ballaigues, Suisse) à une épaisseur de la paroi externe de 0,5-1 mm. Le foramen apical ont été agrandi dans un diamètre approximatif de 2 mm. Les tubes de la dentine ont été arrosés abondamment avec de l'hypochlorite de 3% de sodium et 18% d'EDTA (éthylène diamine-acide tétraacétique), (Ultra Dent, États-Unis), lavé avec de l'eau distillée, puis autoclavés. Pour chaque animal, trois tubes ont été utilisés, deux en tant que supports des deux matériaux testés et un tube vide comme témoin.
WMTA a été mélangé selon les recommandations du fabricant. Diaket a été mélangé à une consistance (poudre ratio liquide de 2: 1) plus épais que les recommandations du fabricant, [21]. Les matières ont été appliquées dans les tubes.
Les animaux ont été anesthésiés en utilisant un schéma thérapeutique comprenant de l'atropine (0,02 à 0,05 mg /kg), du chlorhydrate de kétamine (40-87 mg /kg) et du chlorhydrate de xylazine (13/05 mg /kg). Les peaux dorsale des animaux ont été rasés et désinfectés avec une solution d'iode de 5%. Deux longues incisions centimètre ont été faites dans le dos de chaque animal, d'au moins 2 cm de distance les uns des autres, en utilisant un non. 15 lame (Aesculap AG & Co. KG, Tutlingen, Allemagne) dans une tête à la queue orientation. La peau a été réfléchie et des espaces sous-cutanés ont été créés par dissection. Les tubes de dentine ont immédiatement été implantés dans les espaces. La peau a été fermée avec une suture 3/0 de soie.
Évaluations ont été faites à 7, 30, et 60 jours après l'implantation chirurgicale. Dans chaque période d'évaluation, 7 animaux ont été sacrifiés en utilisant une surdose anesthésique. La peau dorsale a été rasée et les tubes ont été excisés avec le tissu conjonctif environnant. Les échantillons excisés ont été maintenus dans une solution de formol à 10% pendant 2 semaines. Après le traitement des tissus et l'intégration, des coupes en série de 6 um d'épaisseur ont été préparées et colorées avec de l'hématoxyline et de l'éosine. Les sections ont été examinées et évaluées à l'aide d'un microscope optique (Olympus, U-MDOB BX 40, Olympus Optical Co. LTD, Japon) à × 40, × 100 et 400 × grossissements. Pour chaque matériau, la somme et la moyenne des cellules inflammatoires (leucocytes polynucléaires (PMN), les cellules plasmatiques, les lymphocytes, les macrophages et les cellules géantes) et les fibroblastes ont été déterminés dans dix domaines distincts à × 400 grossissement. L'observateur a été aveuglé à la source de tissu
réactions dans le tissu ont été marqués par:. 0, aucun ou peu de cellules inflammatoires (aucune réaction); 1, moins de 25 cellules (réactionnelles douces); 2, entre 25 et 125 cellules (réaction modérée); et 3 125 cellules ou plus (de réaction sévère), [13, 27, 28]. Nécrose et /ou suppuration ont été classés comme «oui» ou «non» Résultats
.
Les résultats ont été analysés statistiquement en utilisant les tests de Kruskal-Wallis et Mann-Whitney pour la comparaison de la sévérité de l'inflammation à des intervalles et des matériaux.
groupe de contrôle
Dans les échantillons obtenus à 7 jours, le tissu de granulation vasculaire a été observée (Figure 1.a) qui a été dominé par les PMN, les cellules plasmatiques et les lymphocytes, avec quelques cellules géantes et les macrophages. tissu de granulation Inflamed qui avait grandi dans les tubes a également été observée (Figure 1.b). A 30 jours, infiltrats de cellules inflammatoires légères, principalement dominées par les lymphocytes et minces capsules fibreuses entourant les tubes, ont été observées (Figure 1.c). tissu de granulation Inflamed a également été remarqué à l'intérieur des tubes, mais avec une infiltration inflammatoire moins (Figure 1.d). Au jour 60, quelques infiltrats de cellules inflammatoires épars ont été observés (Figure 1.e), à ​​côté d'une augmentation de l'activité fibroblastique et une capsule fibreuse plus épaisse. Aucune nécrose n'a été détectée. Figure 1 images histologiques d'infiltration de cellules inflammatoires dans les extrémités des tubes implantés et la croissance interne de tissu de granulation à l'intérieur des tubes dans les groupes témoins et MTA (hématoxyline-éosine). (A) hautement vasculaire, le tissu de granulation modérément inflammation (G) à l'extrémité du tube dentinaire (D) dans le groupe témoin à 7 jours; grossissement x 50. (b) de croissance du tissu de granulation enflammée (I) à l'intérieur de la lumière du tube dans le groupe témoin à 7 jours. L'espace précédemment occupé par l'extrémité du tube dentinaire est représenté par (S); grossissement × 100. (c) Une fine capsule fibreuse (FC) entourant le tube vide de dentine (D) à 30 jours; grossissement x 200 (d) de croissance du tissu de granulation enflammé (I) à l'intérieur d'un tube vide dentinaire (D) à 30 jours; grossissement x 200. (e) une inflammation très modéré observé dans certains cas du groupe témoin à 60 jours, dans laquelle les lymphocytes (L) ont été les cellules prédominantes; grossissement x 400. (f) l'angiogenèse active avec le tissu de granulation enflammé dans la zone en contact avec le MTA à 7 jours. Multinucléée cellules géantes avec englouti MTA (GM); grossissement x 200. (g) Nécrose dans la zone adjacente au matériau MTA (M) à 7 jours; grossissement x 200. (h) de la réaction inflammatoire légère dans un échantillon MTA à 30 jours; grossissement x 400. (i) suppuration (SP) observée dans la zone adjacente au matériau MTA (M) au niveau du tube à 30 jours; grossissement × 50.
Il y avait une différence statistiquement significative dans la somme des cellules inflammatoires entre les trois périodes d'essai pour le groupe de contrôle (P valeur & lt; 0,05). Le nombre de cellules inflammatoires était significativement plus élevée pour les 7 jours par rapport au groupe de 30 jours.
WMTA groupe
Dans les échantillons obtenus à 7 jours, on a observé une nécrose entouré par une angiogenèse active et le tissu de granulation modérément inflammation (figure 1. h g). L'infiltrat est prédominé par les PMN, les lymphocytes, les cellules plasmatiques, des macrophages et des cellules géantes. les réactions inflammatoires similaires ont été observés au jour 30, qui ont été caractérisés par une nécrose et /ou une suppuration, entouré par un infiltrat inflammatoire modérée (figure 1.h, i). activité fibroblastique accrue et les cellules et les macrophages géants rares ont également été détectés (figure 2.a). L'inflammation était doux le jour 60, et dominé par les lymphocytes, les macrophages et les cellules géantes, avec une augmentation de l'activité fibroblastique. En outre, un matériau ostéoïde analogue a été observée au voisinage de la WMTA au jour 60 (figure 2 b) dans une éprouvette. La figure 2 histologique des images des caractéristiques d'infiltration inflammatoire des cellules et une réaction tissulaire à l'extrémité de tubes implanté dans le MTA et les groupes Diaket (hématoxyline-éosine). (A) Quelques macrophages et des cellules géantes (G) observés dans le groupe MTA à 30 jours; grossissement × 400. (b) matériel ostéoïde-like (OS) observée dans la zone adjacente à MTA (M) à 60 jours; grossissement × 100. (c) de nécrose sévère et étendue liquéfiante ou suppuration (N) dans la zone adjacente à Diaket matériau (M) à 7 jours; grossissement x 100. (d) Cellules géantes (G) et des macrophages dans le tissu conjonctif adjacent au Diaket à 30 jours; grossissement x 200. (e) d'une légère inflammation observée dans la zone adjacente à Diaket (M), à 60 jours; grossissement × 100. (f) Prédominance des lymphocytes dans le groupe Diaket à 60 jours; grossissement × 50.
Une différence statistiquement significative a été trouvée dans la somme des cellules inflammatoires entre les trois périodes d'essai pour ce groupe. La somme la plus élevée de cellules inflammatoires a été enregistrée dans le groupe de 7 jours et le plus bas pour le groupe de 60 jours. Toutefois, des différences significatives ont été trouvées seulement entre le groupe de groupe de 7 jours et 60 jours, et entre le groupe de 30 jours et le groupe de 60 jours.
Diaket groupe
Dans les sections obtenues à 7 jours, une vaste liquéfiante nécrose entourée par un tissu de granulation fortement vascularisé enflammée a été détectée (figure 2.c). Les cellules inflammatoires prédominants étaient les PMN, les cellules plasmatiques et les macrophages. A 30 jours après l'implantation, la réaction inflammatoire a diminué avec une augmentation de cellules géantes et des infiltrats macrophage (Figure 2.d). Au jour 60, l'inflammation était légère à modérée (Figure 2.e), et dominé par des lymphocytes et des cellules plasmatiques (Figure 2.f). Aucune nécrose n'a été observée. activité fibroblastique accrue a également été remarqué, mais n'a pas été aussi prononcée que dans le contrôle et les groupes WMTA
Des différences statistiquement significatives ont été observées entre la somme des cellules inflammatoires entre les trois périodes d'essai. (P & lt; 0,05). La seule différence statistiquement significative trouvée était celle entre les périodes de 7 jours et 60 jours (P & lt; 0,05), avec la période de 7 jours présentant la valeur moyenne la plus élevée pour la somme de cellules inflammatoires, suivie de la 30 jours . puis les périodes de 60 jours de comparaison entre les groupes de
7 jours
Il y avait des différences statistiquement significatives (KW = 7,78, p & lt; 0,05) dans le nombre de cellules inflammatoires entre les trois groupes. Le score de cellules inflammatoires médiane dans le groupe Diaket (score médian de 2) était significativement plus élevée que dans le WMTA (médiane score de 1) et le groupe de contrôle (score médian de 1) groupe (p & lt; 0,05). Nécrose a été observée dans tous les échantillons dans le groupe Diaket et en trois exemplaires dans le groupe WMTA
30 jours
Il y avait des différences statistiquement significatives. (KW = 6,84, p & lt; 0,05) du nombre de cellules inflammatoires dans les trois groupes . Le score de cellules inflammatoires médiane dans le groupe Diaket (score médian de 2) était significativement plus élevée que dans le groupe de contrôle (score médian de 1), (p & lt; 0,05). Aucune autre différence significative n'a été trouvée. Nécrose a été observée dans un seul spécimen dans le groupe Diaket et un spécimen dans le groupe WMTA
60 jours
Il y avait des différences statistiquement significatives (KW = 6.43, p & lt; 0,05). Du nombre de cellules inflammatoires dans les trois groupes . Les scores de cellules inflammatoires dans le groupe Diaket (score médian de 1) étaient significativement plus élevés que dans le WMTA (score médian de 0) et le groupe de contrôle (score médian de 0). Nécrose n'a pas été détecté dans aucun échantillon obtenu 60 jours après la discussion The réponse histologique des matériaux endodontiques implantés dans le tissu conjonctif sous-cutané de rats fournit une source préliminaire des informations sur leur biocompatibilité qui est relativement simple et appropriée à l'implantation de. les tests de routine des matériaux endodontiques [29, 30]. Les premières expériences sur les tests d'implantation impliqués insertion directe du matériau testé dans les tissus mous d'animaux de laboratoire [31, 32]. L'inconvénient de ce procédé est qu'une zone relativement grande de matériau est en contact avec le tissu et, par conséquent, la réaction immédiate peut être grave. Par conséquent, l'implantation de la substance d'essai à l'intérieur d'un support est recommandé [12, 13]. En comparaison avec l'application directe de la matière, cette méthode permet de stabiliser le matériau en place, et de réaliser une interface standardisée matériau des tissus [13].
Certaines études antérieures utilisées silicium [30], Teflon [29, 31], et de polyéthylène [13, 33]. Dans cette étude, les tubes de dentine ont été utilisés pour l'implantation sous-cutanée conformément à d'autres études antérieures, de rendre l'enquête actuelle plus cliniquement pertinente [12, 34]. Un inconvénient de l'utilisation de racines humaines comme supports est la difficulté d'uniformisation de la taille des tubes. En outre, une réaction immunologique à des protéines étrangères peuvent se produire [31]. Cependant, la réaction à des tubes de dentine vides était en accord avec les rapports précédents qui ont trouvé que les tubes de dentine vides induits légère inflammation et la formation de capsules fibreuses [12, 34]. Les tubes de dentine vides ont été utilisés comme un contrôle pour exclure toute augmentation du nombre de cellules inflammatoires provoquées par la réaction à la dentine [7, 12].
Les matériaux étudiés ont été utilisés dans l'état unset pour imiter la situation clinique. WMTA est difficile à manipuler, ce qui est l'un de ses inconvénients, car il tend à salir et de contaminer la zone de travail. Par conséquent, une attention méticuleuse a été pratiquée au cours de la mise en place de WMTA dans les tubes de la dentine. Dans la situation clinique, WMTA doit être manipulé avec soin pour minimiser ce problème.
La réaction observée dans le groupe de contrôle était en accord avec les rapports précédents [12-14]. Il y avait une diminution continue significative dans la réponse inflammatoire accompagnée d'une augmentation de l'activité fibroblastique. Bien que les PMN ont été prédominantes au 7e jour, ils ont fait preuve comptent une moyenne plus faible par rapport aux groupes Diaket et WMTA. Cette valeur moyenne a diminué de manière significative à 30 et 60 jours, ce qui indique que les tubes de dentine vides peuvent avoir induit une réaction inflammatoire initiale. La réponse inflammatoire à 7 jours peut être due aux effets toxiques des matériaux implantés ou au traumatisme produite lors de la pose des tubes, alors que 30 et 60 jours, la réponse inflammatoire peut être attribuée à l'effet cumulatif de la toxicité le matériel de test.
La réaction tissulaire à WMTA était comparable aux résultats des études précédentes [12-14]. les résultats de sept jours ont montré une réaction corporelle modérée et étrangère qui a diminué à 30 jours et diminué de manière significative à 60 jours, et a été accompagnée par une augmentation prononcée de l'activité fibroblastique. Ceci indique une augmentation du processus de réparation et de la tolérance du tissu conjonctif. En outre, le matériau ostéoïde comme observé au jour 60 est un peu comparable aux résultats précédents qui décrivent la formation de calcification dystrophique [13].
Les principaux composés présents dans MTA sont de silicate tricalcique, tricalcium aluminate, oxyde de tricalcium et d'oxyde de silicate [ ,,,0],2]. Après réaction avec les fluides tissulaires, l'oxyde de calcium, l'hydroxyde de calcium produit. L'hydroxyde de calcium sera ensuite dissocié en Ca + et OH -. Les ions hydroxyles diffus élever le pH et de promouvoir l'alcalinisation dans les tissus adjacents, qui favorise la cicatrisation [7]. De plus, la biocompatibilité de MTA a également été attribué à sa propension à se libérer du calcium, et sa capacité à former de l'hydroxyapatite [35]. Le plus Diaket a provoqué une forte réaction initiale, mais les deux 30 et 60 jours, les résultats ont montré que la réaction inflammatoire réduite à une réponse légère à modérée. Ces observations sont similaires aux résultats d'une enquête précédente [31]. En outre, une diminution significative de la valeur moyenne de la somme des cellules inflammatoires au jour 60 a été détectée, accompagnée d'une augmentation minime de l'activité fibroblastique.
Cela peut indiquer que Diaket a tendance à induire une plus grave et aiguë inflammatoire initiale réaction avec une nécrose et /ou suppuration liquéfiante que WMTA. A 30 jours, les groupes WMTA et Diaket ont démontré les chiffres comparables de cellules inflammatoires moyennes. La sévérité de la réaction inflammatoire a diminué de façon significative au jour 60. Des résultats similaires ont été obtenus dans une étude animale précédente, malgré les différences dans les méthodologies suivies par rapport à l'enquête en cours [21].
La réponse inflammatoire sévère initiale à Diaket aurait pu être causé par la possible libération initiale des constituants matériels, et quand il y avait une diminution de la quantité de ces substances lessivables, l'inflammation a diminué dans la gravité et le matériel a été plus toléré par les tissus
. Conclusions
en conclusion, la inflammatoire initiale réponse provoquée par WMTA était plus favorable que la réponse provoquée par Diaket. Cependant, avec le passage du temps, il y avait une réduction prononcée de la gravité de la réponse inflammatoire, et une augmentation de l'activité des fibroblastes dans les deux matériaux. Des expériences supplémentaires sont nécessaires pour confirmer ces observations
abréviations
WMTA:.
minérale blanche trioxyde globale
EDTA:
éthylène diamine-tétra acide acétique
PMN:
polynucléaires leucocytes
Déclarations
Remerciements et financement
la recherche a été financée par le décanat de la recherche à la Jordanie Université des sciences et de la technologie numéro de subvention 53/2006.
auteurs fichiers originaux soumis pour les images
Voici les liens vers les auteurs originaux soumis fichiers pour les images. de fichier d'origine pour la figure 1 12903_2010_185_MOESM2_ESM.pdf Auteurs '12903_2010_185_MOESM1_ESM.pdf Auteurs fichier d'origine pour la figure 2 Intérêts concurrents
Les auteurs déclarent qu'ils ont aucun conflit d'intérêts. Les contributions
auteurs
AW ont participé à l'élaboration de la méthodologie de la recherche, l'aide à la préparation des échantillons, la rédaction du manuscrit et l'analyse statistique. AM effectué le travail expérimental, a contribué à la rédaction du manuscrit et à l'examen des spécimens. HH a participé à l'élaboration de la méthodologie de la recherche, et a préparé et examiné les spécimens. Tous les auteurs ont lu et approuvé le manuscrit
finale