Efficacité de chlorhexidine sans alcool pour réduire les niveaux de Streptococcus mutans

ABSTRACTTitle:. Efficacité de chlorhexidine sans alcool pour réduire les niveaux de Streptococcus mutans

But:. Pour comparer les propriétés antimicrobiennes de chlorhexidine sans alcool avec d'autres bains de bouche antimicrobiens

méthodes: Streptococcus mutans (souche GS5), a été cultivé sur géloses et remises en suspension dans un milieu de culture stérile de trypticase bouillon de soja (TSB) supplémenté avec l'extrait de levure. Quatre expériences uniques ont été réalisées en ajoutant chaque inoculums de la suspension bactérienne à l'épreuve des agents antimicrobiens

Résultats:. Expérience n ° 1: Croissance de S. mutans a été totalement inhibée à 5% et 1% des concentrations d'alcool libre chlorhexidine (AFC) et la chlorhexidine contenant de l'alcool (CHX). La croissance bactérienne a eu lieu dans toutes les autres dilutions avec le plus notable dans 1% Biotene & reg; (DO max = 1.383 nm) suivi de 0,01% Biotene & reg; (OD max = 1,328). Le plus grand temps de doublement est de 0,01% CHX à 2,1013 h

Expérience n ° 2:. Le temps de génération et OD max étaient similaires pour toutes les dilutions des différents réactifs

Experiment # 3:. 5 Minute courte l'exposition -terme non dilué CHX a inhibé la croissance de S. mutans. AFC a inhibé la croissance bactérienne pendant 6 heures. Le temps OD max et de doubler étaient 1.288 et 1.1213 h respectivement. La DO max et le temps de génération pour Biotene & reg; étaient 0.891 et 1.5516 h respectivement

Expérience n ° 4: 5. minutes d'exposition à court terme de CHX non dilué et l'AFC a inhibé la croissance de S. mutans. La croissance bactérienne a eu lieu dans toutes les autres dilutions avec le plus notable en pleine force Biotene & reg; (DO max = 1.629), suivi par 1% d'éthanol (DO max = 1.598). Le plus grand temps de doublement est de 5% d'éthanol à 1.706 h

Conclusions:.. Chlorhexidine sans alcool est efficace pour supprimer la croissance bactérienne de S. mutans et, par conséquent, est une alternative viable à la chlorhexidine contenant de l'alcool

INTRODUCTIONAntimicrobial solutions bouche-rinçage sont utilisés dans de nombreuses situations cliniques à des fins prophylactiques et thérapeutiques (1). Plus précisément, bains de bouche sont devenus une procédure d'appoint important pour une bonne hygiène buccale mécanique ou dans la prévention des infections subséquentes à des bactéries de procédures ou immunosuppression chirurgicales intra-buccales due au rayonnement à la tête /neck.1,4,5
< p> le gluconate de chlorhexidine (CHX), un agent antibactérien à large spectre, est l'un des agents antiseptiques les plus largement utilisés dans care.5 dentaires complets efficaces contre les deux micro-organismes Gram-positifs et Gram-négatives, des champignons et certains virus, il a été montré pour inhiber la formation de la plaque, de réduire l'inflammation gingivale et prévenir caries.3,5 dentaires en outre, dans l'usage oral, CHX est exempt de toxicité systémique, et la résistance microbienne ou altérations des microbiote orales n'occur.8,11 pas Toutefois, la longue utilisation de CHX est limitée en raison du développement des dents et de la langue décolorations extrinsèques, ainsi que des altérations du goût conduisant à une diminution compliance.2,3,5,7,9,11 du patient Par conséquent, la majorité des praticiens dentaires ne recommande pas longtemps -terme utilisation quotidienne de CHX comme un bouche-rinse.11 gingivale desquamation et de la muqueuse douloureuse ont également été rapportés dans cases.1,5 sévère

la littérature actuelle prend en charge l'utilisation quotidienne de 0,12% ou 0,2% CHX comme antiseptique agents. Cependant, un facteur limitant supplémentaire est que la chlorhexidine bouche-rinçages couramment utilisés contiennent de l'alcool, ce qui peut provoquer des douleurs, des irritations et être préjudiciable aux patients atteints de mucite, les patients subissant une radiothérapie tête /cou, les jeunes enfants, les patients immunodéprimés, ou la récupération des alcooliques. effets potentiellement néfastes de CHX contenant de l'alcool bouche-rinçage conduit à la formulation d'un nouveau sans alcool 0,12% CHX (AFC) bouche-rinse.1,2,11

Biotene & reg; est une bouche de rinçage sans alcool qui peut améliorer de nombreux symptômes de la xérostomie induite par le rayonnement. Il agit en produisant un système enzymatique antimicrobien dans la cavité buccale qui pénètre dans les parois cellulaires des bactéries formant des plaques, en les détruisant tout gingivale au gumline.12 Ce système enzymatique se compose de protéines de défense innée salivaire humaine; le lysozyme, la lactoferrine et la peroxydase. La lactoferrine est une glycoprotéine de liaison du fer qui affiche une activité bactéricide contre une variété de bactéries sous forme libre de fer, apo-LF et bactériostatique par sequestration.6,10 de fer

Les deux AFC et Biotene & reg; sont des agents antimicrobiens disponibles dans le commerce utilisés pour améliorer l'hygiène bucco-dentaire et de prévenir une infection bactérienne. Cependant, peu d'études ont porté sur l'efficacité de l'AFC comme antimicrobien bouche-rinçage viable.

L'objet de cette étude était de comparer les propriétés antimicrobiennes de chlorhexidine sans alcool gluconate avec d'autres bains de bouche antimicrobiens.

METHODES eT MATERIAUX

espèces de bactéries
: les bactéries sélectionnées pour cette étude se trouve oralement dans la salive, les surfaces des tissus mous et dans le biofilm dentaire; Streptococcus mutans (souche GS5)

des mesures de densité optique:.
Croissance des micro-organismes peuvent être mesurés par le système d'analyse automatisé de croissance Curve Bioscreen C (figure 1).. Bioscreen C est un incubateur contrôlé par ordinateur /lecteur /agitateur. Il dispose de 8 filtres qui vont de 405nm à 600 nm comprenant un filtre à large bande et il utilise une microplaque en nid d'abeille pour mesurer les changements dans la densité optique en fonction du temps pour produire des courbes de croissance microbiologique.

Comme les micro-organismes se développent, ils augmentent la turbidité de leur milieu de croissance.

en mesurant la turbidité de ce milieu au fil du temps, une courbe de densité optique peut être généré. La courbe reflète la croissance (augmentation de la concentration) de l'organisme d'intérêt

BIOSCREEN PREPARATION:.
Quatre expériences uniques ont été menées tester chlorhexidine sans alcool 0,12% (AFC), 0,12% de gluconate de chlorhexidine (CHX) et Biotene & reg ;, bouche-rinçages oraux. Tous les réactifs microbiens ont été filtrés avec 0.22mm filtre microporeux. De l'eau distillée a été utilisée comme témoin négatif tandis qu'un milieu de culture stérile, du bouillon de soja trypticase (TSB) supplémenté avec l'extrait de levure, a été utilisé comme témoin positif. S. mutans (SM souche GS5) a été cultivée sur 1,5% de bouillon trypticase soja complémenté avec 0,3% d'extrait de levure, 0,75% de Bacto-agar et 2,5% de sérum de cheval inactivé par la chaleur et mis à incuber pendant 24 heures à 37 & deg; C. MTSB frais (900 uL) a été inoculé avec les bactéries (100 uL) et les suspensions ont été ajoutées aux agents microbiens d'essai et de l'eau distillée.

Dans la première expérience de quatre dilutions, 5%, 1%, 0,1% et 0,01% du BST, chacun des AFC, CHX et Biotene & reg; ont été faites. Les mêmes dilutions ont été faites avec de l'eau distillée comme témoins. Les inoculums de la suspension bactérienne ont été ajoutés aux réactifs dilués et brièvement vortexés.

La deuxième expérience a testé l'exposition à court terme de deux dilutions, 5% et 1% du BST, chacun des AFC, CHX et Biotene & reg ;. Une dilution à 5% a été faite avec de l'eau distillée comme témoin. Inoculants (1000) uL de la suspension bactérienne ont été centrifugés pendant 1 minute à ~ 13 000 rpm. Les réactifs de test (1000 ul) ont ensuite été ajoutés au culot bactérien et vortexé. Toutes les dilutions ont été laissés à reposer à température ambiante pendant 30 minutes. Chacun a ensuite été centrifugée, suivie de l'élimination du réactif, MTSB lavage, vortex et centrifugation. Le culot formé a ensuite été suspendue en 1000 uL MTSB et vortexé

Les réactifs dans la troisième expérience ont été non dilué (100%) des solutions de AFC, CHX, Biotene & reg. et de l'eau distillée. Dans la quatrième expérience, ils étaient des solutions non diluées de l'AFC, CHX, Biotene & reg; et de l'eau et de quatre dilutions de 1%, 5% distillée, 11,6% et 15%, chacun de l'alcool. Dans les deux essais inoculums (1000) uL de la suspension bactérienne ont été centrifugés pendant 1 minute à ~ 13 000 rpm. Les réactifs de test (1000 ul) ont ensuite été ajoutés au culot bactérien, vortexés et toutes les dilutions ont été laissés à reposer à température ambiante pendant 5 minutes. Chacun a ensuite été centrifugée, suivie de l'élimination du réactif, MTSB lavage, vortex et enfin centrifugée. On a ensuite répété, complétant un deuxième lavage avec MTSB, une centrifugeuse finale et enfin, en suspension dans 1000 ul de MTSB
.

La préparation finale Bioscreen dans les expériences 1, 2, 3 et 4 se composait d'aliquotes (200 uL) des bactéries en combinaison avec les bains de bouche par voie orale, AFC, CHX, Biotene & reg ;, eau distillée et TSB étant placé dans des puits en nid d'abeille (Fig. 2) qui donne 90, 40, 25 et 45 échantillons, respectivement. Chaque aliquote a été distribué cinq fois, dans les différents puits, afin d'assurer l'uniformité et la reproductibilité. L'huile minérale, (0,1 ml) gouttes ont ensuite été distribué dans chaque puits pour éviter l'évaporation. Les puits en nid d'abeilles ont ensuite été placés dans l'analyseur de croissance Bioscreen Microbiological pendant 24 heures à une large gamme de longueurs d'onde de 420 nm à 580 nm pour surveiller les changements dans la densité optique. Les courbes de croissance et le temps de doublement ont ensuite été calculés

RESULTSExperiment # 1: Croissance de S. mutans a été totalement inhibée à 5% et 1% des concentrations de l'AFC et de CHX (figures 3 & amp; 4).. Les bactéries ont été tuées et aucune modification significative de la densité optique (DO) ont été notés. Dans les mêmes conditions, la croissance bactérienne est produite dans toutes les autres dilutions (figures 5 & amp;. 6). La croissance la plus notable a eu lieu dans le 1% Biotene & reg; dilution avec une DO max = 1,383 et un temps de doublement (Td) = 1,4734 h. Cela a été suivi par le 0,01% Biotene & reg; dilution avec une DO max = 1,328 et un h Td = 1,3053. Le plus grand temps de doublement est de 0,01% CHX à 2,1013 h. Les dilutions de l'AFC et de CHX bains de bouche qui ont été inefficaces pour inhiber la croissance bactérienne ont une DO d'environ 1,3 nm, ce qui est similaire à la DO de Biotene & reg; et les contrôles

Expérience n ° 2:. Le temps de génération et OD max étaient similaires pour toutes les dilutions des différents réactifs. La croissance a commencé à environ deux heures pour chaque dilution. Il semble y avoir eu une certaine inhibition de la croissance par rapport à l'expérience d'incubation initiale, cependant, les réactifs ne sont pas efficaces, et les bactéries ont augmenté encore (figure 7).

Expérience n ° 3:. Les commandes, H2O et TSB, ne pas tuer les bactéries et ne fit Biotene & reg; avec un temps de 0,891 et 1,5516 h, respectivement OD max et de la production. L'exposition à court terme non dilué CHX croissance complètement inhibée de S. mutans. AFC a inhibé la croissance bactérienne SM pendant six heures, au moment où il semblait être la croissance bactérienne. Le temps OD max et de doubler étaient 1.288 et 1.1213 h, respectivement. La DO max et le temps de génération pour Biotene & reg; étaient 0.891 et 1.5516 h, respectivement (Fig.8)

Expérience n ° 4:. Cinq minutes d'exposition à court terme de non dilué AFC et CHX a inhibé la croissance de S. mutans. La croissance bactérienne a eu lieu dans tous les autres réactifs et dilutions de l'alcool avec la croissance la plus notable se produisant dans non dilué Biotene & reg; (DO max = 1.629), suivi par 1% d'éthanol (DO max = 1.598). Le plus grand temps de doublement est de 5% d'éthanol à 1.706 h (Fig.9)
.

DISCUSSIONThe observations et les résultats de cette enquête suggèrent que la chlorhexidine sans alcool est une bouche de rinçage efficace pour supprimer la croissance de S. mutans . La première expérience a testé la croissance des bactéries en présence de différentes dilutions (5%, 1%, 0,1%, 0,01%) des réactifs testés. À partir de la première expérience, on a observé que aussi peu que 1% de l'AFC et CHX étaient efficaces pour inhiber la croissance des bactéries. Biotene & reg; n'a pas inhibé la croissance microbienne et les résultats des contrôles, de l'eau distillée et MTSB, ont été comme prévu, aucun homicide a eu lieu.

Après le premier procès, la seconde a consisté à enquêter sur le résultat des bactéries exposant à 1% et 5% des dilutions de mouthrinses antimicrobiens pendant 30 minutes. Le temps de génération et OD max étaient similaires pour les deux dilutions des différents réactifs. En outre, il semble y avoir eu une certaine inhibition de la croissance par rapport à l'essai d'incubation initiale a retardé la croissance des bactéries. Cependant, les réactifs ne sont pas efficaces, et les S. mutans ont augmenté encore.

L'intention de la troisième expérience était de simuler une situation plus clinique. Les S. mutans ont été exposés aux bains de bouche antimicrobiens non dilués, AFC, CHX, Biotene & reg ;, et de l'eau distillée pendant 5 minutes. La chlorhexidine contenant de l'alcool non dilué a complètement inhibé la croissance de S. mutans. A l'inverse, l'AFC a inhibé la croissance bactérienne pendant 6 heures, au moment où il semble y avoir croissance des bactéries. À ce stade, la contamination des autres microbiote était soupçonné dans l'AFC bouche-rinçage. Pour cette raison, on répète l'expérience. En outre, si oui ou non l'alcool était un facteur de confusion devait être déterminée. Ce quatrième essai a montré que, après exposition de 5 minutes pour bains de bouche anti-microbiens non dilué et différentes dilutions d'alcool il n'y avait aucune croissance bactérienne soit le réactif ou le réactif AFC CHX. En outre, les dilutions d'alcool n'a pas inhibé la croissance des S. mutans

Bien que le dernier essai a démontré qu'il n'y a pas de différence dans l'efficacité entre l'AFC et CHX contenant de l'alcool, d'autres études sont nécessaires. (1) afin de déterminer la différence dans la formulation et (2) les mécanismes provoquant l'inhibition des bactéries entre l'AFC et CHX contenant de l'alcool; et cliniquement tester et confirmer la cohérence des résultats présentés dans cette étude. Les données actuelles suggèrent qu'il n'y a qu'un seul essai clinique démontrant l'efficacité de l'AFC par rapport à l'inhibition de la plaque. Les résultats de cette étude étaient compatibles avec celui-ci

En comparant Yokoyama & rsquo;. L'étude (2009), Biotene & reg; a été trouvée être efficace pour inhiber la croissance de l 'Actinobacillus Aggregatibacter, une autre espèce de bactéries. Cependant, dans ce projet de recherche, il a été inefficace contre S. mutans. Peut-être Biotene est efficace contre les espèces bactériennes qui sont principalement anaérobie et trouvé sous la gencive. Si tel était le cas, on peut postuler que Biotene serait mieux servi comme antibactérien bouche-rinçage de la maladie parodontale, alors que, CHX bains de bouche devraient être principalement réservés à la prévention des caries.

conclusion1) sans alcool la chlorhexidine est efficace pour supprimer la croissance bactérienne de S. mutans et, par conséquent, est une alternative viable à la chlorhexidine contenant de l'alcool.

2) l'alcool ne contribue pas aux propriétés anti-microbiennes de

Rebecca Cohen, DDS, Paed Cert, FRCD (C), la classe de 2011; Faculté conseiller, Casey Chen, BDS, PhD, DDS

Remerciements:. Dr Casey Chen pour ses encouragements et Jason Jee et Christine Hwang pour leur aide et leur soutien. Ce document de recherche est soumis à la réalisation partielle des exigences pour l'achèvement du programme de dentisterie pédiatrique avancée à l'école Ostrow Herman de médecine dentaire de l'USC.

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