Résumé de l'arrière-plan
études transversales antérieures ont suggéré que le mode de livraison peut influer sur la composition de la microflore orale. L'objectif de cette étude prospective était de comparer la colonisation salivaire chez les enfants livrés par voie vaginale avec les enfants livrés par césarienne (C-section) au cours de leurs 6 premiers mois de vie.
Méthodes
Le groupe d'étude se composait de 149 consécutivement inscrits nourrissons, livrés soit par voie vaginale (n
= 96) ou par césarienne (n = 53
) que volontaire après consentement de leurs parents. Des échantillons de salive ont été prélevés dans les 2 jours qui suivent la naissance et puis après 1, 3 et 6 mois. Un échantillon de salive de la mère a été obtenu 6 mois après l'accouchement. On a demandé aux parents de remplir un questionnaire sur les facteurs socio-économiques, mode de vie, et de l'hygiène au départ et tout au long de la période d'étude. Tous les échantillons ont été analysés avec 13 sondes bactériennes pré-déterminées à l'aide de l'ADN-ADN checkerboard hybridation.: Résultats
Les groupes étaient équilibrés au départ de tous les facteurs de base pertinents. Gram positif streptocoque (S. mitis, S. salivarius
) affiche les chiffres les plus élevés dans les deux groupes, mais une plus grande diversité a été observée dans le groupe délivré par voie vaginale. A. naeslundi, A. odontolytics, F. nucleatum
et L. salivarius
été détectée uniquement parmi les nourrissons livrés par voie vaginale. La prévalence de S. sanguinis, S. gordoni, R. denticariosa et B. Dentinum
augmenté par âge dans les deux groupes mais la prévalence était significativement plus faible dans le groupe C-section (p
& lt; 0,05). Il y avait un lien entre les mères et leur progéniture concernant le profil microbien salivaire.
Conclusion
La composition microbienne dans la salive varie selon le mode de livraison au cours des six premiers mois de vie.
Mots-clés
C bactéries -Section nourrissons oral colonisation orale Saliva Contexte
Le biofilm orale joue un rôle important dans la santé et de la maladie [1]. La composition est très individuelle et affectée par des facteurs tels que la génétique, l'alimentation, l'âge et le niveau d'hygiène [2]. Selon l'hypothèse de l'hygiène, la séquence et le moment de l'exposition à une variété de souches bactériennes tôt dans la vie semblent être d'une importance pour la colonisation intestinale [3]. Le mode de livraison et la cessation de l'allaitement au sein ont été identifiés comme des facteurs importants dans le microbiote intestinal maturation [4], et cela semble applicable aussi à la cavité buccale. Des recherches antérieures ont montré que les enfants livrés par césarienne (C-section) présentent une diversité microbienne réduite dans la salive en comparaison avec les enfants livrés par voie vaginale [5, 6]. En outre, le profil microbien orale peut discriminer nourris au sein des nourrissons nourris au lait [7]. L'importance clinique à long terme de ces résultats ne sont pas tout à fait clair, mais une réduction de la diversité dans les tripes en corrélation avec un risque accru de développer des maladies chroniques telles que l'asthme et de l'allergie [8]. Les informations de la diversité plus faible chez les nourrissons C-sectionnés est cependant essentiellement dérivée d'études transversales et quelques données longitudinales sont disponibles. Le but de la présente étude était d'analyser des échantillons de salive de nourrissons livrés avec C-coupe à travers les six premiers mois de la vie par rapport à des bactéries clés sélectionnés. Les résultats ont été comparés à un groupe d'enfants livrés par voie vaginale et l'hypothèse nulle est qu'il n'y a pas de différences seraient affichées entre les groupes.
Conception de l'étude de méthodes
L'enquête emploie une conception prospective cas-témoins et était éthiquement . approuvé par le Comité régional d'éthique à Lund, Suède (Dnr 2012/483) qui a le pouvoir d'approuver les études à l'hôpital Halland du groupe
le matériel d'étude est composée de 149 nouveau-nés livrés soit par voie vaginale (V; n
= 96) ou par césarienne (CS; n
= 53). Les participants ont été consécutivement inscrits parmi les volontaires en bonne santé qui sont nés à l'hôpital Halland, Halmstad, en Suède, entre Avril et Décembre 2013. Les deux parents ont signé un formulaire de consentement après information verbale et écrite approfondie. Les critères d'exclusion étaient i) les enfants prématurés, ii) nouveau-nés nécessitant des soins néonatals, iii) les nourrissons ayant une condition médicale claire, et iv) les familles qui ont planifié la réinstallation à l'étranger après la naissance. Le taux d'attrition de 6 mois était de 20% et les abandons en ce qui concerne les suivis désignés sont présentés dans le tableau 1 1.Table participants et la fréquence d'abandon dans les deux groupes (CS = C-section; V = vaginale livraison)
âge
V de
CS total
le taux de décrochage
nouveau-né (1-2 jours )
53
95
148
-
1 mois
45
79
124
16%
3 mois
44
74
118
20%
6 mois
44
73
117
20%
les valeurs du tableau numéro désignent des Saliva de prélèvement des enfants
échantillons de salive ont été prélevés dans les 2 jours après la naissance, puis après 1, 3 et 6 mois avec l'aide de coton-tiges stériles. A la première occasion, les parents ont été soigneusement instruits et montré comment recueillir l'échantillon et transférer le haut dans un tube en plastique marqué. Au suivi désignés, les parents ont reçu le kit de test avec un contenant stérile un bourgeon de coton et d'un tube en plastique avec une feuille d'information illustrée par courrier de surface. Les parents ont été invités à prélever l'échantillon le matin en trempant le bourgeon de coton dans la salive et retourner immédiatement au laboratoire. Lorsqu'un échantillon avait disparu, les parents a été rappelé par le biais d'un appel téléphonique dans les 5 jours. D'une manière similaire, un échantillon de salive de la mère a été obtenu à 6 mois après l'accouchement. Tous les échantillons ont été stockés congelés jusqu'à d'autres analyses. PROCEDE Microbial
Les échantillons ont été traités avec la technologie d'hybridation ADN-ADN en damier selon mur Manning et al. [9]. L'ADN a été extrait avec de la mutanolysine et du lysozyme, comme décrit précédemment [10] et de la qualité de l'ADN a été évaluée à partir du spectre UV entre 200 et 300 nm en utilisant un spectrophotomètre gène Pos (Pharmacia Biotech, Uppsala, Suède). Entières sondes d'ADN génomique d'intérêt potentiel pour la santé bucco-dentaire et de la maladie ont été préparées à partir d'un panel de 13 espèces bactériennes avec désignation de la souche en fonction de la collection de culture de microbiologie orale, Gothenburg, Suède: Actinomyces odontolyticus
G67; Actinomyces naeslundii
2466 (A. oris
); Bifidobacterium dentium
G174; Fusobacterium nucleatum
2865; Lactobacillus casei
3184; Lactobacillus salivarius
3830; Rothia denticariosa
1956; Streptococcus gordonii
2471; Streptococcus mitis
1770; Streptococcus mutans
2482; Streptococcus salivarius
2473; Streptococcus sanguinis
2478; Veillonella parvula
G186. Les comptages bactériens ont été obtenus par le pour cent, procédé dans lequel l'intensité du signal (unités de lumière biomédicale) a été exprimée comme une fraction d'un échantillon standard élevé (10
6 cellules) à l'aide de LumiImager Workstation (Boehringer Mannheim, Mannheim , Allemagne). Le niveau de détection est & gt;. 10 4 cellules par ml d'échantillon
Questionnaire
A l'inclusion, on a demandé aux parents de remplir un questionnaire de 20 questions sur les caractéristiques de la famille, socio-économique, les facteurs de style de vie et habitudes d'hygiène. Un autre questionnaire sur l'élevage, l'alimentation, les habitudes de brossage des dents et des antibiotiques prescrits a été attaché aux envois de suivi et est retourné avec les échantillons Méthodes statistiques de
. Toutes les données ont été traitées avec le logiciel IBM SPSS-(version 22.0 ; Chicago IL, USA). Les différences dans les répartitions en pourcentage entre les groupes ont été calculées avec des tests et des corrélations chi-carré entre les numérations bactériennes chez les mères et leur progéniture ont été exprimés en Spearman coefficient de corrélation. Nous avons considéré p
-values moins de 0,05
. Résultats statistiquement significatifs
Les groupes étaient équilibrés au départ de tous les facteurs de base pertinents, à l'exception de la pause de l'eau (pour les détails exacts, voir le tableau 2). La proportion de filles était un peu plus élevé dans le groupe CS, mais la différence n'a pas été statistiquement significative. Les routines d'alimentation auto-déclarées et l'usage des sucettes sont présentés dans le tableau 3. Les préparations pour nourrissons ont été plus fréquents dans le groupe CS par rapport au groupe V pendant les 6 premiers mois, mais la différence n'a pas atteint la signification statistique. La fréquence des antibiotiques prescrits aux mères pendant les six premiers mois après l'accouchement était semblable (& lt; 15%) dans les deux groupes. Le nombre total de cellules détectées à partir des échantillons V était en moyenne plus élevé que les échantillons CS du tout échantillonnage occasions: naissance: 0,7 vs. 0,5x10 6; 1 mois: 1,3 vs. 0.9x10 6; 3 mois: 1,6 vs 0.9x10 6; 6 mois: 1,5 vs 0.9x10 6 cellules. La prévalence des bactéries sélectionnées sont résumées dans le tableau 4. Une plus grande diversité a été observée dans le groupe V. Par exemple, A. naeslundi
, de A.
, F. nucleatum
et L. salivarius
été détectée uniquement parmi les nourrissons livrés par voie vaginale. La prévalence de S. sanguinis
, S.
gordoni, R. denticariosa
et B. Dentinum
augmente avec l'âge dans les deux groupes mais la prévalence était significativement plus faible dans le groupe CS (p
lt &; 0,05). S. mitis
et S. salivarius
affichés les comptes les plus élevés dans les deux groupes à tous les échantillons, mais les chiffres ne sont pas associés avec le mode de livraison. Il existait une corrélation statistiquement significative entre les mères et leur progéniture concernant le profil salivaire six mois après la livraison par rapport à cinq souches du groupe CS et huit souches dans le groupe V (tableau 5) .Table 2 caractéristiques de la famille de base dans les deux groupes (CS = C-section; V = accouchement par voie vaginale)
variable
CS
V
sexe (filles /garçons)
57/43
44/56
coupure d'eau (oui)
29
100a
Mère née en Suède (oui)
91
91
l'éducation de la mère, l'université (oui)
64
60
Mère fumeur (oui)
0
4
antibiotiques prescrits (mères)
4
4
frères et sœurs (& gt; 2)
6
6
Valeurs de la table désigner pour cent
différence astatistically significative entre les groupes (p
& lt. 0,05, test du chi-carré)
Tableau 3 données autodéclarées des questionnaires distribués 1, 3 et 6 mois après l'accouchement vaginal (V) ou C-section (CS)
variable
1 mois
3 mois de
6 mois de
CS /V
CS /V
CS /V
allaitement maternel (oui)
89/95
71/84
55/69
Les préparations pour nourrissons (oui)
47/32
51/35
50/44
Introduit alimentaire dégustation (oui)
0/0
0/4
72/83
Pacifier (oui)
80/83
82/77
85/71
dents présente (oui)
0/0
2/0
30/32
nettoyage Oral (oui)
0/0
9/3
30/26
de antibiotiques (oui, nourrisson)
0/3
0/1
0/1
antibiotiques ( oui, les mères)
9/5
5/4
0/3
les valeurs du tableau indiquent pour cent
Table 4 Prévalence (≥104 cellules) des souches sélectionnées à la naissance et des intervalles de temps désignés chez les enfants livrés par voie vaginale (V) ou avec C-section (CS)
Strain
naissance
1 mois
3 mois de
6 mois de
CS /V
CS /V
CS /V
CS /V
A. naeslundi
0/5
0/0
0/2
0/2
A. odontolyticus
0 /12a
0 /32a
0 /30a
0 /32a
B. Dentinum
5 /32a
13 /61a
8 /49a
16 /63a
F. nucleatum
0/2
0/11
0 /10
0 /14a
L. casei
0/2
0/0
0 /0
0/0
L. salivarius
0/0
0/0
0/0
0/3
R. denticariosa
0 /12a
3 /22a
10/21
8 /39a
S. gordoni
3 /15a
10/19
13 /32a
13 /38a
S. mitis
73/84
85/94
90/94
93/96
S. mutans
53 /76a
65 /88a
58 /88a
68 /92a
S. salivarius
28/36
45 /67a
53/71
48/70
S. sanguinis
0 /35a
5 /44a
10 /47a
13 /53a
V. parvula
0/0
3 /6
5/6
8/24
les valeurs du tableau pour cent de différence représentent
astatistically significative entre les groupes (p
& lt; 0,05, test du chi-carré)
Tableau 5 colonisation orale de bactéries sélectionnées chez les mères et leurs nourrissons, 6 mois après l'accouchement vaginal (V) ou C-section (CS)
Strain
CS
V
A. naeslundi
NS
NS
A. odontolyticus
NS
0,43
B. Dentinum
0,54
0,28
F. nucleatum
NS
NS
L. casei
NS
NS
L. denticariosa
NS
0,45
L. salivarius
NS
NS
S. gordonii
0,48
0,36
S. mitis
0,59
0,32
S. mutans
0,85
0,36
S. salivarius
0,71
0,48
S. sanguinis
NS
0,56
V. parvula
NS
NS
Les valeurs du tableau indiquent Spearman deux coefficient de corrélation à queue. NS
Non statistiquement significatif
Discussion
Les résultats de cette étude relativement importante prêtent un soutien supplémentaire aux conclusions précédentes que la composition du biofilm orale est affectée par le mode de livraison [5, 6, 11] avec la diversité plus faible chez les nourrissons livrés avec C-section. Par conséquent, l'hypothèse nulle peut être rejetée. Nos résultats doivent cependant être considérés avec une certaine prudence pour un certain nombre de raisons. Tout d'abord, la composition du microbiote salivaire précoce peut être influencée par un certain nombre de facteurs autres que le mode de livraison, tels que le traitement péri-livraison avec des antibiotiques, l'alimentation [12], les pratiques d'alimentation [7, 13], l'utilisation de suces [14], le revenu familial [11, 13], et le brossage des dents habitudes [15]. Dans notre étude, le CS et les groupes vaginalement livrés étaient similaires par rapport à la socio-économie, taille de la famille, le niveau d'éducation de la mère, et le comportement alimentaire de sorte que nous estimons que le risque pour les facteurs confondants comme petite. Même la prescription d'antibiotiques aux mères et à leurs hors-ressorts était égale selon les questionnaires, même si une certaine sous-déclaration peut être suspectée. D'autre part, la technique de l'ADN d'hybridation de l'ADN checkerboard a ses forces et ses limites; le principal avantage est que le procédé permet le dénombrement d'un grand nombre d'espèces en grand nombre d'échantillons et donc, considéré comme un outil utile pour le dénombrement des espèces bactériennes dans les systèmes microbiens complexes [16]. Parmi les limites, possibles réactions croisées et la reproductibilité variable pour différentes souches a été discutée [17]. En troisième lieu, il est possible que la procédure de prélèvement peut avoir provoqué une plus grande variabilité des résultats que la procédure de laboratoire en tant que telle. Ces lacunes, ainsi que le niveau de détection relativement élevé nous ont fait de quantifier les données bactériennes selon la méthode de pour cent comme étant l'alternative la plus fiable [17]. Il est toutefois important de souligner que les valeurs de prévalence rapportés ici ont été basées sur un niveau d'environ 10 4 cellules de seuil; les souches sélectionnées peuvent très bien être présents dans les échantillons, mais non en quantités suffisantes pour être détectées. Ainsi, la prochaine étape naturelle serait donc d'étendre l'application à l'ensemble du microbiome oral. Un quatrième biais possible était le taux d'abandon relativement élevé au cours de l'étude, et nous ne pouvons que spéculer sur son éventuelle influence sur les résultats.
La corrélation intra-familiale de la microflore orale avec une référence particulière à la mère-enfant et acquisition de streptocoques mutans a été décrite à plusieurs reprises avant [18-21]. Fait intéressant, Ruiz-Rodriguez et ses collègues [22] ont échoué à démontrer une relation mère-enfant pour S. mutans
avec la culture classique, mais leur échantillon était petit et S. mutans
a été très rarement détectés (2%) parmi les nourrissons à l'âge de 150 jours. Dans la présente étude, la majorité de tous les enfants du groupe CS et presque tous dans le groupe V recelait S. mutans
à 6 mois et à part les différentes techniques d'échantillonnage et d'analyse, nous avons aucune explication à ces contrastante résultats. Néanmoins, la corrélation mère-enfant clair pour 8 des 13 taches dans le groupe V était intéressant, mais doit encore être étudié avec pour ADNr l'amplification et le séquençage de l'exemple 16.
La question pour combien de temps une différence de livraison dépendant de la colonisation orale prévaut, et si cela peut affecter la santé dentaire plus tard dans la vie, reste ouverte. Il existe cependant des preuves acceptables que l'acquisition précoce de mutans orale streptocoques en général est associée à un risque accru de caries développement [23, 24]. En outre, il existe des rapports suggérant que les enfants livrés avec C-section présentent un risque élevé pour l'asthme infantile [25] et plus de caries dentaires à l'âge de 3-5 ans [26, 27]. Cette relation possible doit cependant être vérifiée dans des contextes plus larges et dans des études prospectives couvrant la jeune dentition permanente.
Conclusions
Dans les limites de la présente étude, il a été conclu que le mode de livraison joue un rôle dans la composition de biofilm orale au cours des 6 premiers mois de vie. les enfants livrés par voie vaginale semblent avoir une plus grande diversité que C-section enfants et une similitude plus étroite avec leurs mères. D'autres études pour enquêter sur une éventuelle influence à long terme sur la santé bucco-dentaire semblent justifiées
Abréviation
CS:.
Césarienne
Déclarations
Remerciements
Le projet a été soutenu par une subvention de la Région Halland, Suède. Les auteurs tiennent à remercier le personnel de la clinique maternelle à l'hôpital Halland et tous les parents pour leur confiance et leur patience. Le feu Mme Kerstin Magnusson (RDH) est reconnu pour son assistance technique qualifiée
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concurrence. intérêts
les auteurs ont aucun conflit d'intérêt à déclarer le KB de contributions des auteurs
:. recueilli toutes les données, effectué des analyses statistiques et a écrit la première ébauche. JR: conçu l'étude, et finalisé le manuscrit. GD: effectuer les analyses microbiennes et a écrit le manuscrit. JD: conçu et supervisé l'étude et finalisé le manuscrit. ST: conçu l'étude, effectué des analyses statistiques et a écrit la première ébauche. Tous les auteurs ont lu et approuvé le manuscrit final.
