3 CFU /ml a inhibé la croissance légèrement pour trois des cinq souches MS (NCTC de S. mutans 10449, OMZ176 et S. mutans les sobrinus de S.
P1: 27), tandis que de faibles concentrations de L. acidophilus
La5 n'a pas affecté la croissance MS. En règle générale, aucune différence significative dans l'inhibition de la croissance n'a été observée entre les souches de référence et la voie orale isolates.Table 2 Inhibition de la croissance de souches de streptocoques mutans par les lactobacilles probiotiques sélectionnées à différentes concentrations cellulaires.
< col>
|
streptocoques mutans (inhibition score)
Lactobacilli
CFU/ml
Ingbritt
NCTC
10449
OMZ176
P1:27
P2:29
L. plantarum 299v
103-109
0
0
0
0
0
L. plantarum
931
103-109
0
0
0
0
0
L. rhamnosus GG
105-109
0
0
0
0
0
ATCC 53103
103
0
1
1
1
0
L. rhamnosus
105-109
0
0
0
0
0
LB21
103
1
1
1
1
1
L. paracasei
105-109
0
0
0
0
0
F19
103
1
1
1
1
1
L. reuteri
105-109
0
0
0
0
0
PTA5289
103
1
1
1
1
1
L. reuteri
105-109
0
0
0
0
0
ATCC 55730
103
1
1
1
1
1
L. acidophilus
109
0
0
0
0
0
La5 *
107
0
1
1
0
1
|
105
1
1
1
1
1
|
103
2
2
2
2
2
scores d'inhibition; 0 = inhibition totale; 1 = légère inhibition;. 2 = pas d'inhibition
* p & lt; 0,05 , test du chi-carré. inhibition de Candida albicans
de croissance toutes les souches de lactobacilles testés ont réduit la croissance de candida, mais l'effet était généralement plus faible que pour les streptocoques mutans. Depuis un motif d'inhibition identique a été affiché pour toutes les souches de candida les résultats des essais pour un seul d'entre eux sont présentés dans le tableau 3. A des concentrations 10 9 et 10 7 UFC /ml, tous les lactobacilles, sauf L. acidophilus La5
et L. reuteri
PTA 5289 a inhibé les cinq souches de candida complètement. A 10 5 UFC /ml, L. rhamnosus
LB21, L. rhamnosus GG
ATCC 53103, le F19 de L. paracasei et la PTA de L. reuteri 5289 affichent une légère inhibition, L . acidophilus
La5 montré aucune inhibition du tout alors que le 299v de L. plantarum, L. plantarum
931 et L. reuteri
ATCC 55730 a exécuté une inhibition totale. A la concentration la plus basse de la cellule, aucune inhibition n'a été enregistrée, sauf pour les deux L. plantarum
inhibition de Candida albicans strains.Table 3 Croissance
ATCC 28366 par lactobacilles probiotiques sélectionnées à différentes concentrations cellulaires.
< col> Strain
concentration cellulaire (UFC /ml)
109
107
105
103
L. plantarum 299v
0
0
0
1
L. plantarum
931
0
0
0
1
L. rhamnosus GG
ATCC 53103
0
0
1
2
L. rhamnosus
LB21
0
0
1
2
L. paracasei
F19
0
0
1
2
L. reuteri de la PTA 5289
1
1
1
2
L. reuteri
ATCC 55730
0
0
0
2
L. acidophilus
La5
1
1
2
2
scores d'inhibition; 0 = inhibition totale; 1 = légère inhibition; 2 = pas d'inhibition.
PH mesures
Le pH initial sur la surface des plaques de gélose M17 et SAB étaient de 6,8 et 5,8, respectivement. Après incubation, le pH a diminué dans toutes les plaques inoculées avec des lactobacilles et a varié entre 3,7 et 5,3 dans les plaques contenant 10 3 UFC /ml (tableau 4). L. acidophilus
La5 affiche les valeurs de pH les plus élevées tandis que les valeurs les plus faibles ont été enregistrées pour le L. plantarum
strains.Table 4 pH final sur la surface de M17 et SAB plaques de gélose après incubation avec lactobacilles probiotiques sélectionnés (103 CFU /ml).
Strain
M17 agar
SAB agar
L. plantarum 299v de la
4.4
3.7
L. 931
4.4
3.7
L. plantarum rhamnosus GG
ATCC 53103
4.6
4.0
L. rhamnosus
LB21
4.5
4.1
L. paracasei
F19
4.8
4.4
L. reuteri de la PTA 5289
5.1
4.0
L. reuteri ATCC 55730
5.1
3.9
L. acidophilus
La5
5.2
5.3
Discussion
La stratégie prédominante pour la prévention des caries repose sur l'influence des processus de ressources et de déminéralisation, principalement par en utilisant des fluorures, mais aussi d'autres facteurs impliqués dans le processus de la carie peut être ciblé [19]. Une alternative pourrait être de promouvoir la colonisation de la carie inhibant les bactéries et dans cet aspect, les bactéries probiotiques constituent un nouveau concept qui a besoin d'une exploration plus poussée. Cette vitro
étude a été réalisée pour comparer l'effet de huit souches de lactobacilles probiotiques commerciales sur l'inhibition de streptocoques mutans et C. albicans
croissance. Nous avons choisi ces souches de lactobacilles particulier parce qu'ils se trouvent dans les produits laitiers, boissons aux fruits, des gouttes, des bouillies, des chewing-gums et les tablettes sur le marché. Le panneau d'essai de streptocoques mutans et de la levure contenait deux souches de référence et des isolats cliniques. Candida albicans
est le plus souvent isolées espèces de candida dans la cavité buccale et constituent jusqu'à 80% des isolats cliniques [20]. En outre, le candida a été attribué une valeur prédictive significative des caries dentaires chez les enfants [21]. La plupart des souches de lactobacilles ont été complètement identifiés par l'analyse biochimique en utilisant le système API 50 CH tandis qu'une identification satisfaisante de la L
. reuteri
et les souches de L. rhamnosus nécessiteraient des méthodes génétiques moléculaires [22].
La méthode de recouvrement de gélose a été considéré comme approprié pour la question de recherche depuis la méthode permet de tester l'effet inhibiteur sur plusieurs souches sur une seule plaque . La méthode a été précédemment utilisée pour démontrer l'inhibition de la croissance in vitro dans
de différents isolats de bactéries pathogènes sur les lactobacilles dans la région uro-génitale féminine [23] et pour étudier l'effet inhibiteur de l'alpha-hémolytiques sur les streptocoques pathogènes d'otite moyenne Streptococcus pneumoniae
, Haemophilus influenzae
et Moraxella catarrhalis
[24]. Koll et al [25] ont utilisé la méthode d'antagonisme différé pour tester la capacité inhibitrice contre streptocoques mutans et C. albicans
. Dans ce procédé les lactobacilles sont coups de couteau inoculé sur la surface de la gélose de fond et des suspensions d'agents pathogènes sont déversés sur les macrocolonies de lactobacilles. Après incubation, la largeur des zones d'inhibition sont mesurées. Le principal avantage de la méthode d'antagonisme différé est le résultat plus précis pendant le procédé de recouvrement de gélose évaluation des concentrations cellulaires différentes permet. Ainsi, les méthodes peuvent être considérées comme des compléments à l'autre.
A l'exception de L. acidophilus
, les présentes souches probiotiques affichent de fortes capacités d'inhibition contre les deux souches de référence et les mutans orales isolats de streptocoques et ces résultats ont été principalement en accord avec les observations récentes de Simark-Mattsson et collègues de travail [17]. Les résultats concernant les souches de candida sont cependant nouveaux et ont montré une variation encore plus importante entre les souches de lactobacilles et seulement trois des huit souches testées présentaient une forte capacité d'inhibition. Ces résultats ont été en désaccord à Koll et al [25], qui n'a pas réussi à démontrer l'inhibition de Candida albicans
048 (type sauvage). Cela pourrait en raison de la méthode utilisée dans les expériences ou le fait que la souche candida testé étaient plus résistantes alors nos souches de référence et des isolats cliniques. La production de bactériocines peut être différente dans les différents systèmes et la capacité de diffuser à travers l'agar. Depuis une croissance significative inhibant les différences entre les lactobacilles probiotiques ont été notés, l'hypothèse nulle a été rejetée. les différences de contrainte dépendant similaires ont déjà été observées en ce qui concerne la capacité métabolique pour former des acides de sucres alimentaires qui diffère de manière significative entre les différentes souches probiotiques [26, 27].
Le pH final dans le milieu a été proposé pour être un facteur important l'inhibition de la croissance, soit directement, soit en raison de la production de bactériocines à un pH bas [28]. Nous avons constaté une tendance similaire dans les présentes expériences; les souches de lactobacilles qui ont causé le pH le plus bas après incubation ont également été plus efficace dans l'inhibition de la SEP et candida croissance. L'inhibition la plus faible des deux streptocoques mutans et C.albicans
a été affiché par L acidophilus
La5 qui avait aussi la production d'acide le plus faible dans les deux systèmes. Dans la méthode de recouvrement de gélose lactobacilles sont cultivés à l'intérieur du MRS-agar et il est possible que ce système particulier non optimale pour L. acidophilus La5
. Le potentiel inhibiteur peut être différent, pour le meilleur ou pour le pire, dans un autre système de test in vivo ou
. Cependant, aussi certaines bactéries avec assez faible production d'acide, tels que l'ATCC de L. reuteri 55730, se sont avérées efficaces à la fois contre streptocoques mutans et candida. Ceci indique que d'autres substances inhibitrices peuvent également être impliqués dans le processus avec H 2O 2 étant parmi les métabolites primaires avec une capacité inhibitrice contre les agents pathogènes microbiens [29]. L'importance de H 2O 2 production pour la santé peut être illustré par la vaginose bactérienne, puisque le manque de lactobacilles avec cette production semble être associée à une composition modifiée de la flore vaginale résultant en une surcroissance anaérobie massif [30] . Tano et al. [31] a conclu que l'effet inhibiteur de l'alpha-hémolytiques streptocoques sur les pathogènes d'otite moyenne les plus probables était due à leur H 2O 2 production. Le glycérol antimicrobien reutérine dérivé est un autre exemple d'une substance d'inhibition de croissance produite par L. reuteri
[32] qui peuvent être impliqués dans la réduction des streptocoques mutans dans la salive [14, 15], ainsi que des influences favorables sur les gingivites [33 ] et des médiateurs inflammatoires dans le fluide gingival [34]. Bien que toute conclusion in vitro
études doit être établi avec prudence, nos résultats fournissent un certain soutien supplémentaire à l'hypothèse que les lactobacilles probiotiques peuvent influencer l'homéostasie et le profil microbien dans la cavité buccale.
Conclusion
Le présent dans vitro
étude a montré que les lactobacilles probiotiques commerciale pourrait inhiber la croissance des souches de référence et isolats oraux de streptocoques mutans et candida, mais la capacité différaient significativement entre les souches. D'autres études cliniques sont nécessaires pour vérifier si oui ou non les différences observées peuvent jouer un rôle dans le biofilm orale complexe.
Déclarations Remerciements
L'étude a été soutenue par des subventions du Conseil du comté de Västerbotten (TUA). Nous sommes reconnaissants au professeur Ingegerd Johansson qui nous a fourni les souches des C. albicans.
Intérêts concurrents
Les auteurs déclarent qu'ils ont aucun conflit d'intérêts. Les contributions
auteurs
PH ont contribué à les travaux de laboratoire, l'acquisition, l'analyse et l'interprétation des données et ont participé à la rédaction du manuscrit. MH a contribué à la conception, les travaux de laboratoire, l'analyse et l'interprétation des données et a pris part à la rédaction du manuscrit. ST a contribué à la rédaction du manuscrit et révisé de manière critique. CSB a contribué à l'analyse et l'interprétation des données, la rédaction du manuscrit et révisé de manière critique. Tous les auteurs ont lu et approuvé le manuscrit final.
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