odontogène
Résumé de l'arrière-plan
kératine produisant des kystes odontogènes (de KPOCs) sont un groupe de lésions kystiques qui sont souvent agressifs, avec des taux élevés de récidive et multifocalité. KPOCs inclus kyste orthokeratinised odontogène (OOC) et kystes odontogènes parakératosiques, qui sont maintenant considérés comme des tumeurs véritables libellés tumeurs odontogènes keratocystic (de KCOTs). GLUT1 est un transporteur de protéine qui est impliquée dans l'absorption active du glucose à travers les membranes cellulaires et qui est surexprimée dans les tumeurs en étroite corrélation avec le taux de prolifération et la tomographie par émission de positons (TEP) Résultats d'imagerie.
Méthodes
Une série de 58 kystes odontogènes kératine production a été évaluée histologiquement et immunohistochimie en termes d'expression de GLUT1. Résultats
les cas de KPOC de données différentes ont été corrélées à l'aide du modèle bêta de régression en fonction du type histologique et de l'expression immunohistochimique de GLUT1, qui a été quantifiée en utilisant deux méthodes morphologiques différentes. Composés 12 OOCs et 46 KCOTs, ce dernier correspondant à 6 syndromique et 40 KCOTs sporadiques. expression GLUT1 était très faible dans les cas de OOC par rapport aux cas de KCOT, avec des différences significatives statistiques lorsque la quantification a été envisagée. Différents modèles GLUT1 de localisation ont été révélées par coloration immunologique, les cellules parabasales montrant une réactivité plus élevée dans KCOTs. Cependant, parmi les KCOTs cas, l'expression de GLUT1 a été incapable d'établir des différences entre les cas syndromiques et sporadiques.
GLUT1 expression de conclusions différenciées entre OOC et les cas KCOT, avec une expression significativement plus élevée dans KCOTs, mais n'a pas fait de distinction entre syndromique et sporadique cas KCOT. Toutefois, étant donné les caractéristiques structurelles de KCOTs, nous fait l'hypothèse que la méthode d'imagerie TEP est probablement pas un outil de diagnostic utile pour KCOTs. D'autres études d'expression GLUT1 et l'examen PET en série KCOT sont nécessaires pour confirmer cette dernière hypothèse.
Mots-clés
Glucose protéine transporteuse immunohistochimie kératine produisant odontogène kyste Keratocystic tumeur odontogène Orthokeratinised kyste odontogène La tomographie par émission de positons fond
Keratin- produisant des kystes odontogènes (KPOCs) forment un groupe hétérogène de lésions kystiques qui sont souvent agressifs de caractère, avec des taux élevés de récidive et multifocalité [1], associée à une activité proliférative marquée [2, 3]. Le spectre lésionnel de KPOCs comprend des kystes principalement orthokeratinised odontogènes (OOC) et kératokystes odontogènes, qui, selon les directives de l'OMS [4] sont également appelées tumeurs odontogènes comme keratocystic (de KCOTs), conformément à KCOTs être de véritables excroissances tumorales. La gestion efficace de ces lésions kystiques est sujette à discussion fréquente [5] et la transformation maligne est possible, bien que très rare [6].
glucose, comme source d'énergie primaire, pénètre dans la cellule par une famille de transporteurs appelé GLUT, dont au moins 13 membres sont maintenant connaître l'expression spécifique des cellules [7]. Au sein de ces familles, GLUT1 ou érythrocytes transporteur de glucose est surexprimée dans les tumeurs, en particulier dans les lésions malignes, comme le glucose est la principale source d'énergie de ces croissances néoplasiques [8]. Ceci est basé sur l'utilisation d'une méthode d'imagerie, la tomographie dite émission de positons (PET) seul ou associé à la tomodensitométrie (TEP-TDM), qui a été utilisé radiotracer le glucose analogique 18F-fluorodésoxyglucose (18FGD) [9].
dans la zone de la tête et du cou, GLUT1 a également été surexprimé à des moments particuliers dans certaines tumeurs bénignes [10, 11], en particulier ceux dont l'activité proliférative marquée [12]. De même, dans certaines tumeurs bénignes odontogéniques avec un taux élevé de récidive, il a été observé que la surexpression GLUT1, dans la mesure où il peut être utile pour le PET ou PET-CT pour évaluer la récurrence de ces tumeurs bénignes [13]. Cependant, dans notre connaissance, l'expression de GLUT1 n'a pas été étudié dans KPOCs avec un taux élevé de récidive, qui sont actuellement considérés comme une véritable tumeurs odontogènes avec une forte probabilité de rechute [1, 4, 5].
Dans le présent étude, nous avons cherché à analyser, pour la première fois à notre connaissance, GLUT1 expression dans une série de KPCOs, pour différencier les sous-types histologiques et d'évaluer le potentiel d'utilisation de la TEP dans le diagnostic de ces lésions, similaires à ce qui a été rapporté dans d'autres des tumeurs bénignes de la tête et du cou avec des taux élevés de récidive [13].
Méthodes
Nous avons étudié 58 cas de KPOCs qui ont été diagnostiqués sur une période de 10 ans (2005-2015) au Département de Pathologie de la Fe Hôpital universitaire, Valence, Espagne. matériel histologique a été récupéré à partir du stockage. Notre travail fait partie d'un projet déjà approuvé par notre conseil Institutional Review (Comité ETICO de Investigación Clínica -CEIC-) (protocole no. 2013/0045) et les lignes directrices énoncées dans la Déclaration d'Helsinki, telle que révisée en 2008 Seúl -Corea- ont été strictement suivies. Avant d'effectuer la chirurgie orale, le consentement éclairé écrit a été obtenu chez tous les patients, la communication de la participation de ses échantillons de biopsie par voie orale dans cette étude immunohistochimique. Nous avons choisi des cas en utilisant une base pathologique de données de diagnostic (Pat Win® version 4.1.4). Nous avons effectué une recherche rétrospective de 10 ans en utilisant les termes de recherche "keratocyst", "kyste primordial", "tumeur odontogène keratocystic", "orthokeratinised kyste odontogène", et "kyste kératinisée", comprendre la nomenclature variée [14] utilisé dans ces lésions .
Toutes les coupes histologiques originales ont été examinés au microscope par deux observateurs (BVS, FVS), et ont été reclassés en utilisant les directives de l'OMS 2005 (4) et les critères diagnostiques énoncés dans le OOC [15, 16]. Les données cliniques, radiologiques et chirurgicales sur tous les patients ont été recueillies à partir des dossiers médicaux à l'aide de la plate-forme Mizar® 2.0 à l'aide du viseur Luna® 3.0. Nous avons noté les données suivantes: l'âge; le genre; localisation de la lésion (mandibulaires et /ou maxillaire); les résultats de suivi clinique /radiologique, nombre de récurrences; et toutes les données cliniques, pathologiques ou génétiques suggérant une association syndromique. Nous avons utilisé les critères de Kimonis et al. [17] pour diagnostiquer le syndrome de carcinome basocellulaire névoïde (NBCCS).
Sections 5 um d'épaisseur ont été découpées à partir des blocs de paraffine originaux et montées sur des lames de verre poly-Llysine- revêtu avant la coloration immunohistochimique. Epitope a procédé à 97 ° C pendant 20 min dans une solution à pH élevé EnVision FLEX Target Retrieval, suivi d'un lavage pendant 5 min dans EnVision FLEX Wash Buffer. GLUT 1 a été immunocolorée en utilisant un anticorps polyclonaux concentré (Master Diagnostica, Grenade, Espagne), à 1/50 dilution. Le temps d'incubation est de 20 min et la coloration a été visualisée en utilisant le système de haut-pH EnVision FLEX. sections placentaires et érythrocytes membranes servis, respectivement, interne et externe, les contrôles de coloration positifs et les contrôles négatifs ont été sections d'essai de maquettes colorées (l'anticorps primaire a été remplacé par un tampon phosphate salin -PBS-).
GLUT 1 immunocoloration à niveau épithéliale de KPOC a été quantifiée en utilisant le système de microscopie numérique Leica DMD108 (Leica Microsystems
©, Wetzlar, Allemagne) et deux procédures différentes. Tout d'abord, l'épaisseur (valeurs de 0 à 100%) de l'épithélium marqué par GLUT1 a été mesurée. Deuxièmement, un score de immunoréactivité pour GLUT1 (IRS-GLUT1), sur la base de l'IRS décrit par Remmele et al. [18], a été créé. IRS évalue deux paramètres: l'intensité immunocoloration (0 = absence; 1 = faible, 2 = modérée; 3 = forte) et le pourcentage de cellules marquées (valeurs de 0 à 4: 0 = 0%; 1 = 1-25%; 2 = 25-50% 3 = 50 à 75% 4 = 75 à 100%). Produit des deux paramètres fournit les IRS (valeurs de 0 à 12). En outre, l'emplacement de immunocoloration (basale, suprabasale, intermédiaire ou superficielle) a été enregistré.
Les résultats obtenus ont été exprimés par la moyenne, l'écart-type (sd), la gamme médiane et interquartile pour chaque type lésionnel. Pour comparer les différences dans l'expression de GLUT1, l'épaisseur de pourcentage de l'épithélium tachée et le score IRS ont été comparés, en utilisant le modèle bêta de régression, rescaling les variables "Score" et "épaisseur de pourcentage taché" à intervalle [0-1]. Résultats de l'analyse statistique a été effectuée à l'aide du logiciel statistique R, la version 3.1.2, compte tenu d'une valeur de P inférieure à 0,05 comme une indication de la signification statistique.
Après examen histologique, les 58 KPOCs ont été classés, en utilisant les critères de l'OMS, en 46 KCOTs et 12 OOCs. Sur les 46 cas KCOT, 6 ont été considérés comme syndromique KCOT (S-KCOT) parce que d'autres lésions ou anomalies compatibles avec la présence de NBCCS ont également été notées. Le tableau 1 résume les données épidémiologiques, ainsi que la fréquence des récurrences, sur la base des informations fournies par le suivi clinique et radiologique. Notamment, le diagnostic en aucun cas dans notre série a été réalisée en utilisant l'imagerie PET.Table 1 Les données épidémiologiques et de suivi
Type lésionnel
N ° cas
moyen âge (années)
ratio H /F
un
% Récurrence
Suivi Situation et b
Mb
-
83,33%
OOC
12
35,50 ± 12,10
7/5
39,0 ± 26 , 01
0%
Mx
-
16,66%
Mb
-
75,00%
NS-KCOT
40
45,67 ± 21,20
21/19
29,6 ± 31,04
35%
Mx
-
22,50%
Mb & amp; Mx
-
2,50%
Mb
-
33,33%
S-KCOT
6
23,00 ± 18,07
1/5
112,0 ± 76,10
100%
Mx
-
16,33%
Mb & amp; Mx
-
50,00%
une moyenne clinico-radiologique suivi exprimé en mois
b Mb: mandibulaire; Mx: maxillaires
S-KCOT (six cas) affectés cinq femelles et un mâle, âgés de 9-54 ans, et l'âge moyen des patients au moment du diagnostic était de 23 ± 18,07 années. Tous les patients avaient récurrences; le nombre moyen de récurrences était de 3 ± 1,41 sur un temps de suivi moyen de 112 ± 76,1 mois. Les lésions se sont produites dans les maxillaires et mandibulaires (trois patients), mandibule seul (deux patients), et maxillaires seul (un patient). La région prémolaire a été le plus fréquemment touchée, suivie par les régions molaires et antérieures
non-syndromique KCOT (NS-KCOT; 40 cas) est survenue chez 21 hommes et 19 femmes (rapport M /F: 1,10). Avec une moyenne âge de 45,67 ± 21,2 années (extrêmes, 9-84 ans), et 35% des patients (14 sur 40) avait récurrences (une moyenne de 1,4 ± 0,6 rechutes) sur 29,6 ± 31,04 mois de suivi. De tous les patients, 75%, 22,5% et 2,5% présentaient des lésions dans la mandibule, le maxillaire, ou les deux, respectivement. La région mandibulaire prémolaire a été le plus fréquemment affecté, et la région antérieure moins touchée.
OOCs ont été notées dans sept hommes et cinq femmes, et l'âge moyen au moment du diagnostic était de 35,5 ± 12,1 années (gamme, 19-65 ans). De tous les patients, 83,5% avaient une atteinte mandibulaire exclusivement, et seulement deux avaient des lésions dans le maxillaire. La zone mandibulaire molaire, suivie de la région mandibulaire prémolaire, a été le site le plus souvent affecté. Cinq des douze kystes (41,6%) ont été associés à des dents impactées et ont d'abord été cliniquement et radiologiquement diagnostiqués à tort comme des kystes dentigères. Aucun patient n'a eu de multiples lésions OOC, et aucun patient n'a eu récidive ou développé d'une autre lésion pendant un temps de suivi moyen de 39 ± 26,1 mois (extrêmes, 9-95 mois), ce qui confirme une différence significative (p = 0,039
) comparativement à OOC contre toutes KPOCs par rapport à la récidive.
Après avoir effectué immunohistochimie dans notre série KPOC (fig. 1 et 2), nous avons observé que l'expression de GLUT1 était faible et discrète en OOC, montrant seulement une faible réactivité cytoplasmique et membraneuse, qui a été distribué, dans la base, parabasale et des couches intermédiaires de l'épithélium kystique, parfois avec une prédominance de la réactivité basale. En revanche, l'immunoréactivité était plus grande dans KCOT, avec immunomarquage membraneuse plus prononcée dans parabasale que dans les cellules basales. cellules intermédiaires de KCOT ont également été marquées mais avec immunomarquage modérée, souvent un peu plus élevé que la cellule de base. De plus, nous avons observé que GLUT1 immunocoloration était très similaire, à la fois en intensité et l'emplacement, dans S-KCOT et les cas NS-KCOT. Figue. expression 1 GLUT1 dans KCOT et OOC. KCOT (a et b) montrant une GLUT1 prononcée immunocoloration avec un motif essentiellement membraneuse (a). Immunoréactivité est particulièrement marquée dans le niveau de l'épithélium intermédiaires (b) parabasale et. Faible immunocoloration GLUT1 dans OOC (c et d), avec un motif cytoplasmique et aussi légèrement membraneux granulaire, un peu plus prononcé au niveau de base (d). (GLUT1, 200x et 400x)
Fig. expression 2 GLUT1 dans KCOT et OOC. Vue panoramique et les détails de GLUT1 immunocoloration KCOT (a, b, c et d) et des échantillons OOC (e, f, g et h), l'affichage de la proportion différente de l'épaisseur de l'épithélium avec GLUT1 immunocoloration. Érythrocytes (astérisques) apparaît avec un marquage intense, comme un contrôle positif interne. (GLUT1, 100, 200x et 400x)
En ce qui concerne la quantification de l'expression de GLUT1, l'IRS-GLUT1 (score avec des valeurs allant de 0 à 12) résultats numériques étaient généralement faibles (tableau 2), en particulier dans les cas de OOC (score moyen: 3,84 ± 2,93) par rapport aux cas KCOT (score moyen: 5,53 ± 2,62). Par rapport deux scores moyens, en utilisant le modèle de régression bêta, une tendance statistique proche de la signification (p = 0,057
) a été trouvé, par rapport à l'IRS du groupe OOC, qui étaient inférieurs ceux du groupe KCOT. De même parmi les cas KCOT, les cas S-KCOT ont montré une IRS légèrement plus élevé (6,28 ± 2,13) que les cas NS-KCOT (IRS: 5,37 ± 2,72) et que les valeurs de l'IRS des deux sous-groupes S-KCOT et NS-KCOT, mais sans différence significative (p = 0,477
) .Tableau 2 GLUT-1 expression dans les cas de KPOC
en revanche, dans l'évaluation de l'expression par le pourcentage d'épaisseur de l'épithélium GLUT1 + (tableau 2) (fig. 2), nous constaté que les cas de OOC ont une épaisseur plus faible (31,46 ± 19,94%) avec GLUT1 + immunocoloration que les cas KCOT (56,61 ± 22,34%), le et la différence était statistiquement significative (p = 0,002
). Ainsi, l'analyse de l'épaisseur en pourcentage de l'épithélium GLUT1 + coloration a permis une discrimination des deux sous-types de KPOC. Enfin, dans la S-KCOT sous-groupe, l'épaisseur du pourcentage de GLUT1 + immunocoloration (66,42 ± 17,96%) était supérieure à celle dans le plan (NS-KCOT) cas sporadiques (52,03 ± 22,60%), les quoiqu'avec pas de différence significative (p
Discussion de
= 0,128). dans la présente étude, nous avons analysé pour la première fois à notre connaissance, l'expression de GLUT1, un transporteur de protéine impliquée dans l'absorption active du glucose à travers les membranes cellulaires, dans une série de KPOCs, qui constituent un groupe hétérogène de lésions odontogènes kystique, qui sont souvent agressifs de caractère, avec des taux élevés de récidive et multifocalité [1], et sont associés à une activité proliférative marquée [2, 3].
expression GLUT1 a une relation importante avec la méthodologie 18FGD-PET, un développement rapide modalité fonctionnelle-imagerie qui a montré de grandes promesses dans les domaines de la primaire, récurrente et la détection de la tumeur métastatique, ainsi que dans la planification et le suivi de la thérapie de diverses tumeurs [19] .
GLUT1 ou érythrocytes transporteur de glucose est le membre le plus connu de la famille GLUT des transporteurs insulino-indépendant qui sont surexprimés dans les lésions tumorales [7], ceux en particulier malignes, étant donné la consommation accrue de glucose présent dans les cellules tumorales nécessaires pour fournir l'énergie à la prolifération cellulaire [8]. expression GLUT1 dans différents modèles de croissance de la tumeur a été étroitement corrélé, d'abord, avec le taux de prolifération cellulaire, et, deuxièmement, avec l'efficacité de la méthodologie 18FGD-PET comme technique d'imagerie diagnostique [20], étant donné que, comme le glucose, le 18FDG traverse la membrane cellulaire par l'intermédiaire GLUT, puis est soumis à une phosphorylation par l'hexokinase pour former FDG-6-phosphate. FDG-6-phosphate est pas métabolisé davantage et accumule dans les tissus avec le métabolisme du glucose actif [21]. Dans le spectre
lésionnel de KPOC, des formes kystiques du caractère relativement inoffensifs ont été identifiés, comme le soi-disant OOC [ ,,,0],15, 16]; kératokystes odontogènes et des formes agressives également inclus, libellés classique [1] et aujourd'hui appelé KCOT [4]. Ces dernières lésions montrent une nette activité proliférative [2, 3] et ont un fort potentiel de récidive [5], au point d'être considéré comme la croissance de la tumeur odontogène vrai [4].
Dans nos résultats, nous avons vérifié que le OOC présent dans basales, parabasales et des couches intermédiaires une expression très limitée de GLUT1. Comparativement cas KCOT montrent une forte réactivité, axée principalement sur la couche de cellules parabasales. En outre, les niveaux d'expression de GLUT1 quantifiés dans OOC et KCOT ont montré une différence statistiquement significative (ou sont proches de la signification statistique) en fonction de l'épaisseur de l'épithélium kystique marqué par GLUT1 ou IRS-GLUT1, respectivement. Cependant, dans notre étude, l'expression de GLUT1 pas distinguer entre les cas syndromiques et sporadiques de KCOT.
Dans les tumeurs, l'expression de GLUT1 est bien corrélé avec des taux de prolifération cellulaire étant donné le métabolisme du glucose actif de tumeurs hautement proliférantes [21]. Cette relation a été confirmée dans notre étude par les nettes différences dans l'expression de GLUT en OOC et KCOT. Nos résultats semblent être en accord avec ceux d'autres études qui ont rapporté des différences évidentes dans les taux des deux lésions odontogènes kystiques de prolifération, en utilisant divers marqueurs immunohistochimiques prolifératifs, tels que Ki 67 [2] ou la cycline D1 [2, 3]. expression GLUT1 a été créé dans nos cas de KCOT, avec une intensité plus élevée, en particulier au niveau des cellules parabasales, et ces données a renforcé le rôle des cellules parabasales en tant qu'éléments de protagonistes dans la croissance tumorale de KCOT [2, 3]. Considérant que le type de traitement effectué est connu pour avoir une influence remarquable des taux de KCOT [5] de récurrence, il convient de noter que, étant donné le caractère rétrospectif de notre étude, avec diverses et non-homogènes traitements, il est impossible de établir avec certitude la relation entre l'expression de GLUT1 et la récurrence lésionnelle.
Un autre aspect à considérer est la relation entre l'expression de GLUT1 et l'efficacité de la détection des tumeurs par TEP ou combiné PET-CT. Plusieurs études immunohistochimiques ont montré une surexpression dans les tumeurs de GLUT1 et malignes humaines d'une corrélation entre l'expression GLUT1 et la progression néoplasique [21]. En outre, la surexpression de GLUT1 a été signalé à être étroitement liée à l'absorption 18FGD sur le PET, parce 18FGD est également repris par le transport intracellulaire par GLUT1 [21-25].
Utilisations et applications de PET sont paradoxalement sans s'y limiter possibles des tumeurs malignes; ainsi, dans la région de la tête et du cou, il a été noté que certaines tumeurs bénignes [26], comme l'adénome pléomorphe [10], myofibrome [12] et adénome ceruminous [11], montrent positivité par PET. Ces lésions bénignes sont souvent inclus dans la liste des erreurs et les pièges possibles dans l'évaluation des cancers tête et du cou à l'aide de PET, mais cette bonne connaissance peuvent fournir des informations de diagnostic utile dans un contexte clinique adéquate [26].
Dans les tumeurs odontogènes , une précédente étude [13] a montré quatre cas de améloblastome, une tumeur bénigne avec un taux élevé de récidive, avec une réactivité contre GLUT1 et de positivité dans l'examen PET, postulant que le PET-TAC peut être utile dans le diagnostic d'imagerie de récurrences dans améloblastome. Dans ce rapport [13], GLUT1 immunomarquage n'a pas été quantifiée, il est donc impossible de comparer nos résultats KCOT avec ceux rapportés dans améloblastomes. D'autre part, il n'y a aucune étude publiée sur l'utilisation de la TEP-TDM dans le diagnostic ou le suivi des KCOT, et dans notre série de KPOC, aucun cas subi PET ou de l'examen TEP-TDM.
Cependant, malgré cette cette dernière limitation, plusieurs points suggèrent que la méthodologie PET est pas un outil de diagnostic utile dans le cas de KCOT. En premier lieu, l'IRS-GLUT1 moyen constaté dans notre étude était faible (5,53 ± 2,62) sur une ponctuation maximale possible de 12, et un second aspect très important à considérer est la structure de la tumeur. Ainsi, KCOT est une lésion tumorale kystique où GLUT1 réactivité est limitée à la muqueuse épithéliale. Otsuru et al. [13] ont rapporté un cas de améloblastome unicystic et trois types non-unicystic. Curieusement, améloblastome unicystic ont montré une réactivité inférieure à GLUT1 et inférieure absorption 18FDG par rapport aux types de tumeurs solides [13]. Cette constatation suggère que l'efficacité de 18FGD-PET est relié, indépendamment de la réactivité de GLUT1, le volume de la masse tumorale [27]. En outre, l'hypothèse selon laquelle la méthodologie PET-CT est probablement pas utile dans le cas de KCOT, est établie parce que l'absorption cellulaire de 18FGD par KCOT n'a pas atteint un niveau suffisant pour provoquer une adéquate SUV max (valeur maximale normalisée). D'autres études, l'analyse de l'expression de GLUT1 et PET en série KCOT, sont nécessaires, à notre avis, pour déterminer si l'analyse de l'expression des GLUT1 en améloblastome est applicable à KCOT et si 18FGD-PET est un outil utile dans le diagnostic de KCOT récidive.
GLUT1 expression de conclusions différenciées entre OOC et les cas KCOT, avec une expression significativement plus élevée dans KCOTs, mais n'a pas fait de distinction entre les cas de KCOT syndromiques et sporadiques. Toutefois, étant donné les caractéristiques structurelles de KCOTs, nous fait l'hypothèse que la méthode d'imagerie TEP est probablement pas un outil de diagnostic utile pour KCOTs. D'autres études d'expression GLUT1 et l'examen PET en série KCOT sont nécessaires pour confirmer cette dernière hypothèse
abréviations
GLUT1:.
Érythrocytaire transporteur de glucose 1
KPOC:
kératine produisant des kystes odontogènes
KCOT:
tumeur odontogène keratocystic
OOC:
orthokeratinised kyste odontogène
NBCCS:
névoïde basocellulaire carcinome syndrome
PBS:
solution saline tamponnée au phosphate
IRS: pointage
immunoréactive
PET:
par émission de positons
CT: tomographie
calculée
18FGD:
18F-fluorodésoxyglucose
OMS:
Organisation mondiale de la Santé
< dfn> S-KCOT:
syndromique tumeur odontogène keratocystic
NS-KCOT:
tumeur odontogène keratocystic syndromique non
Déclarations
Remerciements
les auteurs remercient David Hervas Marín pour son aide à l'analyse statistique et l'examen critique de l'étude
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Les auteurs déclarent qu'ils ont aucun conflit d'intérêts de la conception de l'étude de la contribution de
auteurs:. BVS. Collection de spécimens biologiques: BVS, FVS. révision histopathologique: BVS, FVS. Traitement des échantillons /étude immunohistochimique: FVS. Analyse des données: BVS, LFN. Interprétation des résultats: BVS, LFN. Rédaction du premier projet: BVS, LFN. Rédaction de dratf final: FVS. Examen critique du manuscrit: Tous les auteurs. Tous les auteurs ont lu et approuvé le manuscrit final.
