Abstract
agents fluorures topiques se sont révélés être la méthode la plus efficace dans le traitement de l'émail déminéralisé après les traitements en cabinet blanchiment. Ainsi, cette étude visait à examiner les effets des deux agents post-blanchiment fluoration différents: 1,5% de titane tétrafluorure (TiF
4) (9200 ppm) et de fluorure de 2,1% de sodium (NaF) (9500 ppm), sur la perte de calcium . de l'émail après un défi acide
Méthodes
Dix prémolaires maxillaires ont été sectionnés en quatre morceaux, puis divisés en quatre groupes suivants: Groupe 1: contrôle, conservé dans de la salive artificielle, pas de traitement; Groupe 2: 38% de peroxyde d'hydrogène (HP); Groupe 3: 38% HP suivie de 1,5% TiF 4; Groupe 4: 38% HP suivie solution NaF 2,1%. Les échantillons ont été soumis à une déminéralisation pendant 16 jours, rafraîchir la solution tous les 4 jours; qui est, sur le 4e, 8e, 12e, et 16e jours. ion calcium (Ca 2 +) concentration a été déterminée par un spectrophotomètre d'absorption atomique. Les résultats des données ont été analysées à l'aide Friedman et tests de Wilcoxon (p = 0,05).
La perte de Ca 2+ dans chacun des groupes d'essai a été comparée à celle du groupe témoin, dépeignant qu'il y avait une différence statistiquement significative entre les groupes après 4, 8, 12 et 16 jours et au total (p & lt; 0,05). Le calcium libéré à partir des groupes fluorure appliqué était plus faible en comparaison avec le groupe contrôle HP et 38%. A la fin du 16ème jour, la quantité totale de calcium libéré du TiF 4-échantillons traités (9,12 mg /mL) était inférieure à partir des échantillons NaF traités (13,67 mg /ml) (p & lt; 0,05 Conclusions de).
en ce qui concerne les résultats de notre étude in vitro
dans, le risque d'une déminéralisation a été significativement réduit avec l'utilisation de TiF 4 et NaF après blanchiment avec 38% HP. TiF 4WAS trouvés pour être plus efficace dans la prévention de Ca 2 + libération en raison de l'attaque acide par rapport à NaF. Dans le cas d'une exposition acide intra-orale, l'utilisation d'actualité 1,5% TiF 4 et 2,1% des agents NaF pourrait être bénéfique après le blanchiment avec 38% HP.
Mots-clés
blanchissement déminéralisation fluorure de sodium tétrafluorure de titane matériel électronique supplémentaire
La version en ligne de cet article (doi:. 10 1186 /1472-6831-14-113) contient du matériel supplémentaire, qui est disponible pour les utilisateurs autorisés blanchissement
Contexte a été. accepté comme une méthode de traitement des dents décolorées. Récemment, des produits nouveaux en-office de blanchiment qui utilisent des concentrations élevées de peroxyde d'hydrogène (HP) ont fait au bureau des traitements plus facile. Cependant, les effets de ces produits sur l'émail sont encore une question ouverte et doivent être clarifiées. Lorsque les dents vitales sont blanchies, suite du contact direct entre l'agent de blanchiment et la surface d'émail externe, la surface d'émail de la couronne de la dent peut être affectée par des taux élevés de HP dans les agents de blanchiment, ce qui provoque des changements structurels et morphologiques. Il existe de nombreuses études sur la réduction de la microdureté ainsi que la perte de calcium à partir de l'émail blanchie [1-4]. En outre, certains changements dans l'émail blanchi ont été décrits comme étant légèrement défauts érosifs promus par l'agent de blanchiment [4-7].
L'effet positif des produits fluorés hautement concentrés liés à l'inhibition de la déminéralisation et l'érosion est bien documentée [8]. Différentes applications topiques de fluorure comme le fluorure de sodium (NaF), le fluorure de phosphate acidulé, le fluorure stanneux et sont largement utilisés dans la promotion de l'émail reminéralisation. Cependant, contrairement aux agents couramment utilisés, il a été suggéré dans la littérature que le tétrafluorure de titane (TiF 4), peut avoir un effet plus important sur l'émail reminéralisation. En outre, l'utilisation de produits fluorés après des procédures de blanchiment a été également révélée bénéfique [2, 9, 10]. Que le fluorure topique est appliquée après le blanchiment, la perte minérale est considérablement réduite, microdureté est rétablie, et la résistance de l'émail de la déminéralisation est augmentée [4, 10, 11].
Fluorure a été confirmé reminéralisation des lésions en augmentant la résistance à l'acide attaque en formant une couche de fluorure de calcium pour inhiber la déminéralisation [9]. En outre, la formation d'une couche d'émail a été démontré que lorsque des surfaces d'émail ont été traitées avec un pH bas TiF 4 [12, 13]. Cependant, il n'y a pas de données disponibles dans la littérature sur l'effet préventif de ces applications sur la poursuite de la déminéralisation. Ainsi, le but de cette étude était d'examiner les effets de deux agents différents de fluoration post-blanchiment (NaF et TiF 4) sur le Ca 2 + perte de l'émail après un défi acide. Les hypothèses nulles testées étaient: (1) aucune différence sera observée dans Ca 2+ libération entre les groupes fluorées et non fluorées de blanchies émail surfaces, après avoir été soumis à une attaque acide; ainsi, ces agents fluorure ne seront pas affecter la sensibilité de l'émail blanchi à poursuivre déminéralisation et (2) aucune différence dans Ca 2+ de presse sera notée entre NaF- et TiF 4 traités surfaces en émail après avoir été soumis à plus déminéralisation blanchissement suivante avec 38% Méthodes
HP.
Cette étude a été approuvée par l'Université Ege, Faculté de médecine, Comité d'éthique de la recherche (19/10/2012) et le consentement éclairé écrit a été reçu par les participants.
Dix prémolaires maxillaires
préparation des échantillons extraits à des fins d'orthodontie à l'Université Ege, Faculté de médecine dentaire ont été sélectionnés pour cette étude in vitro
dans. Tous les participants ont donné leur consentement avant le processus d'extraction écrit. Les dents extraites ont été rincés dans de l'eau du robinet, et nettoyés de la plaque et les débris avec une pièce à main dentaire et brosse. Les buccales, palatine, et les surfaces occlusales ont été vérifiés sous un stéréomicroscope, et les dents avec des défauts de l'émail ou des fissures ont été rejetées. Dix dents sélectionnées ont été stockées dans 0,9% de NaCl et 0,1% de thymol pendant 1 semaine à 4 ° C afin d'éliminer la reproduction de micro-organismes, puis on rince avec de l'eau distillée. Chaque dent a été sectionnée bucco-palatin en deux moitiés avec un disque de diamant. Ces moitiés ont ensuite été sectionné longitudinalement en deux parties, de sorte que quatre échantillons ont été obtenus à partir de chaque dent. Ces échantillons ont ensuite été assignés au hasard à l'un des quatre groupes, à condition que chaque partie de chaque dent serait dans l'un des quatre groupes différents (tableau 1). Ensuite, les dents ont été recouvertes avec de la cire, sauf pour les groupes d'essai émail surface.Table 1 de Groupes
N
application de fluorure
Agent de blanchiment
pH
temps d'application F
1
10
Aucun agent -------- -
---------
2
10
38% HP
--------
--------
3
10
38 % HP
2,1% NaF
~ 1.2
1 minutes
4
10
38% HP
1,5% TiF4
~ 1.2
1
procédure de blanchissement
minutes
Tous les spécimens dans trois des groupes d'essai ont été traités avec un agent commercial de 38% HP blanchiment en cabinet (Opalescence Xtra Boost; Ultradent, South Jordan, UT, USA) selon les instructions du fabricant. Les échantillons non traités dans le quatrième groupe ont été utilisés comme groupe témoin et gardées dans de la salive artificielle (0,7 mmol /l de CaCl 2, 0,2 mmol /L de MgCl 2, 4,0 mmol /l de KH 2PO 4, 30,0 mmol /l de KCl, 20,0 mmol /l de HEPES,., pH 7,0) pendant la période d'essai [14, 15]
Une couche épaisse (~ 1 mm), de 38% de PV (pH ≅ 7) a été appliquée les surfaces de l'émail des échantillons dans les groupes d'essai (tableau 1). Pour atteindre une efficacité optimale, le gel de blanchiment a été agité /agité toutes les 5 minutes et rafraîchi toutes les 15 min. La durée totale de la demande était de 45 min par jour. Cette procédure a été répétée tous les deux jours durant 3 jours. Après avoir retiré le gel de blanchiment, les dents ont été rincés, séchés et conservés dans de la salive artificielle jusqu'à ce que la procédure suivante.
Processus post-fluoration
Deux des trois groupes d'essai ont été traités avec deux agents de fluorure différents avec approximativement la Les concentrations identiques; 1,5% TiF 4 (Aldrich Chem. Co, Milwaukee, WI, USA) (pH = 1,2, 9200 ppm) et 2,1% NaF (Merck, Suisse) (pH = 1,2, 9500 ppm). Ils ont été appliqués pendant 60 s à l'aide d'une pipette tandis que le troisième groupe de test a été laissé non traité et conservé dans de la salive artificielle pendant la période d'essai après le processus de blanchiment.
Processus de déminéralisation
Immédiatement après l'application du blanchiment et agents de fluorure pour le délai prescrit, les spécimens ont été rincés avec un jet d'eau et séchée avec jets d'air. L'émail a été ensuite recouvert avec le standard "o" cire en forme de manière à exposer une zone de fenêtre ronde standard (6,83 mm [2]) et d'acide acétique tamponnée à l'acétate 0,34 M de sodium (pH = 4) a été utilisé comme tampon de déminéralisation. Un sel de calcium monohydraté [Ca (H 2PO 4) 2 H 2 O)] a été dissoute pour obtenir 10 mmol /L de Ca 2+ et 20 mmol /L PO 4 3 dans la solution [16].
Chaque échantillon a été traité avec 50 ml d'une solution dans des tubes à essai en polyethylene. Les spécimens ont été déminéralisé en quatre périodes consécutives de plus de 4 jours. A la fin du quatrième jour, chaque échantillon a été retiré du tube à essai et on les place dans un nouveau tube, qui contient une solution tampon fraîche. Les solutions précédentes ont été maintenues dans leurs tubes à tester ensuite pour leur Ca 2+ concentration à l'aide d'un spectrophotomètre d'absorption atomique (AAS) comme effectuée dans des études antérieures [4, 16].
Analyse du calcium a été réalisé avec l' AAS en utilisant 0,1 mL de chaque solution de déminéralisation, qui a été diluée avec 4,9 ml d'eau distillée. Pour éviter l'interaction des ions de magnésium et de phosphate, 50,000 mg /L de lanthane chlore (LaCl 2) a été ajouté à chaque tube à essai pour compenser 10% LaCl 2 dans chaque solution tampon. La même procédure a été appliquée à blanc (tampon) et des solutions étalons de calcium. La quantité de calcium libérée de la dent de tampon a été calculée en mesurant la différence de Ca 2+. La concentration de calcium dans les échantillons a été détectée avec un AAS (Varian Spectra-10 plus AA; Varian, Melbourne, Australie) (longueur d'onde: 422,7 nm; fente 0,5 nm). Les résultats du calcium libéré dans le tampon après la 4e, 8e, 12e, et 16e jours ont été comparés au moyen de tests Friedman et Wilcoxon.
Le Ca 2 + concentrations des échantillons ont été mesurés à la fin de la 4e, 8e , 12e, et 16e jours (tableau 2, figure 1). La perte de Ca 2+ dans le contrôle, 38% HP, 38% HP + NaF, et 38% HP + TiF 4 groupes ont été évalués cumulativement tous les 4 jours, et à la fin du 16e jour, 15,07 ± 1,81 pg /mL, 22,44 ± 2,52 pg /mL, 13,67 ± 1,86 pg /mL et 9,12 ± 2,40 pg /ml ont été obtenus au total, respectivement (figure 2) .Tableau 2 ions calcium (Ca2 +), la libération de les échantillons blanchis traités avec 1,5% TiF 4 et 2,1% NaF en mm 2 (mg /ml)
N
4ème jour
8ème jour
12e jour
jour 16
groupe total
contrôle
10
Mean
3,59
3,2-
3,72
4,55
15,07
Std dev
0,54
0,59
1,23
0,89
1 , 81
Min.
3,01
2,46
2,46
2,74
12,6
Max.
4,93
4,38
6,58
5,75
18,36
38% HP
10
Mean
5,75
5,18
5,56
5,95
22,44
Std dev
1,6
1,52
0,71
0,37
2,52
Min.
3,83
3,01
4,66
5,48
18,36
Max.
7,95
8,5
6,85
6,58
27,68
38% HP + NaF
10
Mean
2,05
3,15
3,94
4,52
13,67
Std dev
0,83
0,58
1,01
0,83
1,86
Min.
0,82
2,19
2,46
3,29
10,68
Max.
3,01
4,11
5,75
6,03
15,61
38% HP + TiF4
10
Mean
1,15
1,94
2,66
3,37
9,12
Std dev
0,92
1,54
0,63
0,48
2,4
Min.
0
0
1,64
2,46
4,93
Max.
2,46
4,11
3,56
3,83
11,5 de
figure 1 l'ion calcium (Ca 2+) concentrations des échantillons mesurés à la fin de la 4e, 8e, 12e et 16e jours (pg /mL).
Figure 2 L'ion calcium total (Ca2 +) Les concentrations des échantillons mesurés à la fin du 16e jour (mg /ml). Le plus, la perte de Ca 2+ dans chacun des groupes d'essai a été comparée à celle du groupe témoin en utilisant le test de Friedman. Une différence statistiquement significative n'a été observée entre les groupes après 4, 8, 12 et 16 jours et au total (p & lt; 0,05). Le test de Wilcoxon a été utilisé pour identifier d'éventuelles différences statistiquement significatives entre les groupes.
Après le processus de déminéralisation, il y avait beaucoup moins de Ca 2+ libéré dans les groupes blanchies /fluorure traité (38% HP + NaF et 38 % HP + TiF 4) que dans le groupe blanchi seulement (38% HP) et le groupe témoin. Lorsque les échantillons NaF et TiF 4-traitées ont été comparées, il n'y avait pas de différences significatives entre les quantités de Ca 2+ libérés des échantillons après la 4e, 8e, et 16e jours (p & gt; 0,05). Cependant, à la fin de la période d'essai, la quantité totale de Ca 2+ dans la solution tampon a été significativement inférieure pour les TiF 4-échantillons traités que pour les échantillons NaF traités (p & lt; 0,05) (tableaux 2 et 3). Ainsi, il pourrait être suggéré que TiF 4 traités échantillons étaient plus résistant à l'acide que NaF-traité samples.Table 3 différences statistiques entre les matériaux de tests groupes
4ème jour
8e jour
12e jour
total
contrôle de la journée 16
× 38% HP
0,007
0,017
0,022
0,005
0,005
contrôle × 38% HP + NaF
0,036
0,798
0,444
0,878
0,721
contrôle × 38% HP + TiF4
0,005
0,059
0,167
0,059
0,005
38% HP × 38% HP + NaF
0,009
0,005
0,022
0,009
0,005
38% HP × 38% + HP TiF4
0,005
0,013
0,007
0,005
0,005
38% HP + NaF × 38% + TiF4
0.074
0.241
0.047
0.059
0.017
différences statistiquement significatives HP entre les groupes (p & lt; 0,05).
Aucune différence statistiquement significative (p & gt; 0,05). de la discussion
concentrations élevées de HP qui favorisent l'émail des altérations de surface ramollir la couche superficielle de la surface de l'émail, augmenter la porosité de la surface et libérer plus Ca 2 + que de faibles concentrations de HP et de peroxyde de carbamide (CP) [4, 15, 17]. Ainsi, 38% HP a été recruté pour la présente étude pour étudier la Ca 2+ libéré des surfaces d'émail blanchies après un défi acide. Avec cette forte concentration désignée, il avait pour but d'observer le maximum Ca 2+ libération après un nouveau processus de déminéralisation.
Modifications dans le composant minéral de l'hydroxyapatite peut être un indicateur de l'évolution de Ca 2+ les niveaux de l'émail. . Rotstein et al
[1] ont montré que la plupart des agents de blanchiment peuvent provoquer divers changements dans les taux de calcium, de phosphore et de potassium dans des tissus dentaires durs; tandis que Tezel et al.
[4] démontré que 35% et 38% HP a causé Ca 2 + perte des surfaces d'émail. Dans la présente étude, Ca 2+ libéré de l'émail des échantillons traités avec 38% HP était significativement plus élevé que le groupe témoin non traité (p & lt; 0,05). Sur la base du Ca 2+ valeurs, ce résultat suggère que des concentrations élevées d'agents de blanchiment provoquent des altérations de la surface après un défi acide.
L'application de fluorure fortement concentré favorise la formation d'une CaF 2 analogue à la couche [18]. Ce dépôt est ensuite dissous, ce qui permet de diffuser de fluorure dans l'émail sous-jacent, de la salive, ou d'une couche de plaque recouvrant la dent. Il est supposé qu'une partie du fluorure soutient la reminéralisation de l'émail. Les résultats d'une étude précédente a confirmé que les phosphates et les protéines de la salive revêtues de la couche de fluorure de calcium sur l'émail comme réservoir contrôlant le pH. Cette couche a agi pour diminuer la déminéralisation et reminéralisation promouvoir [19].
Al-Qunaian et al.
[20] ont étudié les effets des agents sur la carie de l'émail sensibilité humaine et de blanchiment ont rapporté que aucune différence significative dans la carie susceptibilité ont été observée entre les échantillons témoins non traités et les échantillons traités avec 10% de CP, CP 20% avec du fluorure et 35% de HP. Il n'y avait pas de différences significatives entre les échantillons traités et contrôlés pour les dents traitées avec 10% de CP ou 35% de HP. Cependant, les échantillons traités avec un gel de blanchiment contenant 20% de CP avec le fluorure avait considérablement réduit la carie sensibilité par rapport à leurs témoins non traités. Il a été affirmé que cet effet pourrait être lié à l'incorporation de fluorure dans 20% de gels de CP contenant du fluorure, et les résultats étaient en accord avec des études de laboratoire que le fluorure amélioré reminéralisation de l'émail.
Dans la présente étude, les agents de fluorure ont été appliqués à la blanchies l'émail et ensuite soumis à une autre déminéralisation. Lorsque les groupes d'essai qui ont été blanchies avec 38% de PV ont été comparées, la diminution de Ca 2+ perte du groupe TiF 4 traité 1,5% a été détectée comme étant la plus faible (tableau 2). En ce qui concerne ce résultat, on peut supposer que TiF 4 peut être efficace pour protéger la surface de l'émail décolorés contre l'attaque acide. Fait intéressant, pas Ca 2 + libération a été détectée à partir de trois spécimens de TiF 4 groupe au cours des 4 premiers jours, et il n'y avait pas non plus Ca 2 + libération de deux échantillons pendant le deuxième intervalle de 4 jours (Tableau 2). Nous supposons que cet effet pourrait être le résultat de la formation d'émail après actualité TiF 4 application. Il est connu que la formation d'une couche d'émail dure moins de 10 s après l'application du TiF 4 [21]. La capacité de TiF 4 pour protéger l'émail fortement contre l'action d'un acide est un effet synergique de formation d'émail et une augmentation de la teneur en fluorure d'émail. La forte teneur en fluorure et une grande diminution de la solubilité trouvée dans TiF émail 4 traité suggère qu'une réaction du fluorure avec l'émail est impliqué [22]. Dans une étude antérieure, Tezel et al.
[16] ont rapporté que TiF 4 a été jugée plus efficace que Duraphat (NaF, 2,26% de F), soit Elmex (fluorure d'amine, 1,25% de F) dans la prévention artificielle la formation de lésions émail. Attin et al.
[23] ont rapporté que la fluoration est efficace pour augmenter la résistance de l'émail contre la déminéralisation par des substances érosives. De même, les résultats de cette étude ont démontré que la résistance de l'émail blanchi contre l'attaque acide a augmenté après 1,5% TiF 4 traitement.
La comparaison de la Ca 2 + pertes des groupes de tests qui ont été blanchis avec 38% de HP a révélé que la diminution de Ca 2 + pertes du groupe 2,1% de NaF traité était également plus faible, ce qui indique que le NaF peut également protéger les surfaces d'émail contre l'attaque acide. Lorsque le groupe NaF traité a été comparé avec le groupe témoin, on a vu que la quantité de Ca 2+ perdu dans le groupe NaF était significativement différent pendant les 4 premiers jours (p & lt; 0,05) (tableau 3). Cependant, lorsque le groupe de NaF traité a été comparé avec le groupe HP 38%, la différence était statistiquement significative au cours de toute la période d'essai (16 jours) (p & lt; 0,05).
Cependant, lorsque l'effet du traitement NaF contre attaque acide a été comparé à TiF 4 le traitement, on a observé que son influence n'a pas été aussi forte que TiF 4 (tableau 3, figure 1). Tveit et al.
[24] supposé que des complexes ont été formés entre TiF 4 et de l'hydroxyapatite, sur la base d'une forte liaison du composé de titane et de l'atome d'oxygène du groupe phosphate. Mundorff et al.
[22] ont suggéré que TiF 4 a agi avec de l'émail à la fois chimiquement, en diminuant solubilité de l'émail, et physiquement, en raison de la formation d'un glacis protecteur sur la surface de l'émail. van Rijkom et al.
[25] ont comparé l'effet de l'érosion d'inhibition du traitement topique de fluorure sur la base du dépôt de matériau CaF 2 analogue à l'aide de 1% et 4% de NaF TiF 4. Il a été conclu que la réduction de Ca 2+ perte était plus stable TiF 4 que pour le groupe de NaF et la réduction semble être plus faible avec de plus longues durées d'exposition acides.
En général, l'absorption de fluorure émail déminéralisé est plus élevé par rapport à son émail [26]. Il est supposé que le fluorure appliqué peut pénétrer facilement à travers la structure poreuse de l'émail déminéralisé et qui peut créer un plus grand nombre de sites de rétention possibles [27, 28]. Selon les résultats d'une étude [29], l'émail blanchi et fluorée était plus résistant contre les attaques érosives que l'émail blanchi /fluorées et écru /fluorées. Dans la présente étude, à la fin de la période d'essai, la quantité totale de calcium libéré des échantillons blanchis /fluorées était inférieur à celui du groupe témoin (écru /fluorées) et la différence était significative dans TiF spécimens 4 traités (p & lt; 0,05) (tableau 3). Ce résultat est remarquable en ce blanchi et les dents fluorées peuvent être plus résistantes aux attaques acides que les dents saines. auraient besoin Ces résultats à étudier avec d'autres études.
Dans la dernière décennie, il y a eu un intérêt croissant pour déminéralisation et reminéralisation études en raison de la demande de techniques de traitement minimalement invasives. Lors de la numérisation à travers la littérature, nous avons rencontré un certain nombre de différentes techniques appliquées dans ces types d'études. In vitro
déminéralisation en utilisant des tampons d'acide et in vitro
déminéralisation /reminéralisation en utilisant un modèle pH-Cyling sont les techniques les plus fréquemment utilisées qui possèdent à la fois des avantages et des inconvénients. Il est important de choisir le modèle le plus simple et le plus pratique appropriée. Comme pour les études précédentes, nous avons préféré en utilisant AAS pour déminéralisation in vitro
d'observer l'impact des agents de fluorure sur la Ca 2 + perte après une nouvelle déminéralisation. Cette méthode est une méthode très sensible mais fiable pour l'analyse du calcium, ce qui permet d'éviter l'interaction d'autres solutés [30, 31]. Il peut être utilisé avec confiance pour quantifier l'érosion de l'émail et de la dentine, et analyse leur composition chimique des minéraux de presse [32-34].
Sur la base des résultats de la présente étude, l'hypothèse nulle qui indique qu'il n'y aurait pas de différence entre la quantité de Ca 2+ libéré des surfaces d'émail qui ont été traités avec NaF et TiF 4 après un défi acide a été rejeté. Il a également été montré que l'application topique de fluorure réduit la quantité de Ca 2+ libéré des 38% HP-traités surfaces d'émail après plus déminéralisation. Conclusions de TiF a eu un effet beaucoup plus prononcé que NaF dans la protection des surfaces d'émail contre les attaques acide après blanchiment avec 38% HP.
On peut conclure que le post-blanchiment application de fluorure peut être bénéfique dans la réduction du risque de déminéralisation causé par une attaque acide après les procédés de blanchiment et de reminéraliser les surfaces d'émail blanchies. Déclarations de En outre, des échantillons TiF 4-traitées libérés moins Ca 2+ échantillons que NaF-traités, ce qui indique que TiF 4 peut être plus efficace que NaF dans la prévention des dommages causés par l'attaque acide.
Remerciements
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Les auteurs déclarent qu'ils ont aucun conflit d'intérêts. Les contributions
auteurs
HK ont participé à la conception de l'étude, les données recueillies, et a participé à la rédaction du manuscrit. ZE a analysé les données, a révisé le manuscrit, et a reçu l'approbation pour cette version à publier. HT conçu de l'étude, a participé à sa conception, et a effectué les analyses statistiques. Tous les auteurs ont lu et approuvé le manuscrit final.
