endodontique primaire et secondaire
Background
Résumé Pour déterminer l'effet antibactérien de la thérapie photodynamique sur Enterococcus faecalis (E. faecalis)
biofilms dans infectés expérimentalement canaux radiculaires humains dans les infections primaires et retraitements endodontiques.
Méthodes
cent soixante dents monoradiculées extraites avec un canal radiculaire ont été préparés en utilisant des instruments ProTaper. Soixante-dix spécimens ont été laissés sans remplissage de canal radiculaire et autoclavés. Les canaux radiculaires de 70 autres spécimens ont été remplis avec Thermafil et AH Plus et les remplissages canalaires ont été retirés après 24 heures à l'aide de fichiers ProTaper D et plasma stérilisées. Les échantillons ont été infectés avec un isolat clinique de E. faecalis
pendant 72 heures. Des échantillons ont été prélevés à l'aide des points de papier stériles pour déterminer la présence de E. faecalis
dans les canaux radiculaires. Les échantillons ont été divisés au hasard en groupes en fonction de leur traitement avec 20 dents chacun et un contrôle. Dans le groupe PDT les dents ont été traitées à l'aide PDT, consistant en le bleu photosensibilisant toluidine et la source de lumière PDT à 635 nm. Dans le groupe de NaOCl (hypochlorite de sodium), les canaux radiculaires ont été rincés avec 10 ml de 3% de NaOCl. Dans le groupe NaOCl TPD les canaux radiculaires sont rincées avec 10 ml de 3% d'hypochlorite de sodium et ensuite traitées par PDT. Des échantillons ont été prélevés après des traitements à l'aide de points de papier stériles. En outre, le matériau restant de remplissage de canal a été récupéré à partir des parois du canal radiculaire. Les fractions de survie des échantillons ont été calculées par comptage des unités formant des colonies. Résultats de Une analyse unidirectionnelle de la variance (ANOVA) a été appliquée aux données pour évaluer l'effet de différentes techniques de traitement.
traitement antimicrobien des canaux radiculaires ont entraîné une réduction significative de la charge bactérienne dans tous les groupes. irrigation NaOCl éliminé E. faecalis
le plus efficacement possible. TPD seul était moins efficace par rapport à l'irrigation NaOCl et la combinaison de l'irrigation et de NaOCl HAP. Conclusions de niveaux CFU récupérées à partir du matériau de remplissage après NaOCl irrigation des canaux radiculaires ont été 10fold plus élevé par rapport à la PDT et la combinaison de l'irrigation NaOCl et PDT.
thérapie photodynamique tués E. faecalis
dans les infections endodontiques primaires expérimentales et se retira des canaux radiculaires humains. PDT est un complément efficace dans la désinfection du canal radiculaire, en particulier dans les retraitements endodontiques.
Mots-clés
thérapie photodynamique PDT photoactive chimiothérapie photothérapie laser Racine désinfection canal infection endodontique Enterococcus faecalis électronique matériel supplémentaire
La version en ligne de cet article (doi :. 10 1186 /1472-6831-14-132) contient du matériel supplémentaire, qui est disponible pour les utilisateurs autorisés
Contexte
un traitement de canal est la combinaison de l'instrumentation mécanique d'un système de traitement de canal, sa. débridement chimique et le remplissage avec un matériau inerte, conçu pour maintenir ou rétablir la santé des tissus périradiculaires. Bien que, les micro-organismes infectant sont supprimés pendant le débridement mécanique combiné avec l'irrigation chimique, les bactéries résiduelles sont facilement détectables dans environ 50% au moment du remplissage du canal radiculaire, en dépit de l'irrigation extensive avec de l'hypochlorite de sodium [1]. Les bactéries ont été trouvées dans isthmes, les canaux latéraux, les nageoires, les ramifications et structures anatomiques, qui restent inaccessibles pour l'instrumentation mécanique [2, 3].
Les bactéries et les toxines bactériennes restantes dans le système de canal après la préparation de la chimio-mécanique ou entrer dans la rempli système de canal via salivaire microfuites, les fuites de la restauration coronale ou inadéquat remplissage du canal radiculaire peut conduire à l'échec [4-7]. la maladie post-traitement associé à un traitement endodontique pauvre peut être causé à la suite de ne pas utiliser la digue, le manque d'accès résultant dans les canaux manqués non traités racines, l'instrumentation inadéquate, désinfection inadéquate, insuffisante remplissage du canal radiculaire ou des erreurs iatrogènes, par exemple instrument fracturé, perforation, rebord [8] Racine canal de retraitement de. est considéré comme plus difficile par rapport à un traitement de canal primaire comme il y a des obstacles habituellement canalaires à surmonter, par exemple retrait gutta-percha, matériaux canalaires tels que les points d'argent, des poteaux ou des instruments fracturés, correction des erreurs iatrogènes tels que des corniches ou des perforations [8]. Des études antérieures ont montré que le matériau de remplissage de canal ne peut pas être complètement éliminé laissant gutta-percha et /ou un scellant sur la paroi du canal radiculaire rendant la désinfection du système de canal plus difficile par rapport aux traitements de canal primaire [9-11].
après l'enlèvement du remplissage du canal radiculaire et d'autres obstacles canalaires la contamination bactérienne résiduelle doit être réduite au minimum pour un traitement endodontique avec succès [12]. Une méthode préconisée est alternée irrigation à l'aide d'hypochlorite de sodium et d'un agent chélateur, par exemple, l'acide citrique ou l'acide éthylènediaminetétraacétique [13]. composés de chlorhexidine et d'iode ont également été préconisée comme irrigants supplémentaires pour canal radiculaire (re) traitement [14].
échecs endodontiques sont associés à des proportions élevées de micro-organismes aérobies et facultatifs Gram positif [15]. Enterococcus feacalis
, qui peut être trouvé dans les canaux radiculaires traités et non traités, est fortement associée à des échecs [16]. Pseudomonas
, staphylocoques
et streptocoques
sont également étiologiques pour les échecs.
La thérapie photodynamique (PDT), également connu en tant que thérapie de photoradiation, photothérapie, photochimiothérapie, ou la chimiothérapie photoactive (PACT) est un traitement médical, qui utilise l'activation d'un agent de photosensibilisation (photosensibilisateur), par exposition à la lumière d'une longueur d'onde spécifique en présence d'oxygène [17]. Il y a un transfert d'énergie depuis le photosensibilisant activé à l'oxygène disponible qui aboutit à la formation d'espèces d'oxygène toxiques, tels que l'oxygène singulet et des radicaux libres. L'oxygène singulet et les espèces radicales provoquent une destruction rapide et sélective des micro-organismes. La plupart des photosensibilisants sont activés par la lumière entre 630 et 700 nm. Les principaux photosensibilisants trouvés dans la littérature sont hématoporphyrine dérivés (620-650 nm), la phénothiazine, comme le bleu de toluidine et le bleu de méthylène (620-700 nm), cyanine (600-805 nm), des agents phytothérapeutiques (550-700 nm) et hytalocyanines (660-700 nm) [18-20].
HAP a été montré comme thérapie adjuvante au traitement endodontique classique pour optimiser la réduction microbienne dans les canaux radiculaires des infections primaires endodontique [21-23]. Garcez et al. [24] ont étudié l'effet de la PDT dans retraitements endodontiques in vivo. Ils ont constaté que la PDT comme un adjuvant pour un traitement endodontique classique conduit à une réduction supplémentaire significative de la charge bactérienne après l'irrigation à l'aide d'hypochlorite de sodium, le peroxyde d'hydrogène et de l'EDTA et est efficace contre les bactéries multirésistantes. En retraitements il est impossible de retirer le canal radiculaire remplissant complètement, ce qui entrave la désinfection du système de canal. D'après les résultats précédents, PDT est censé avoir un effet antimicrobien supplémentaire après l'irrigation du canal radiculaire, en particulier sur les micro-organismes résistants.
Le but de la présente étude est d'étudier l'effet antibactérien de la thérapie photodynamique (PDT) sur Enterococcus faecalis
biofilms dans infectés expérimentalement canaux radiculaires humains d'infections endodontiques primaires et secondaires.
Méthodes
échantillons de dents
Pour cette étude, nous avons sélectionné cent soixante intactes dents permanentes humaines avant et prémolaires extraites. Deux radiographies ont été prises de chaque échantillon, l'une buccale-linguale /palatine et une image de mésiale-distale, afin d'assurer que les spécimens avaient des chambres de pâtes normales, des canaux radiculaires de brevet et apex entièrement formés sans aucun signe de résorption. Dents avec des obturations canalaires ont été exclus.
Les dents ont été extraites au Centre de médecine dentaire, Département de chirurgie maxillo-faciale, Centre médical universitaire de Freiburg, en raison de la douleur dentaire aiguë, complications inflammatoires sévères de maladies systémiques, dans le contexte de orthodontique le traitement, les infections aiguës (abcès), la mauvaise santé générale ou, dans le cas des dents de sagesse, avant les complications du traitement orthodontique. Les patients ont donné leur consentement éclairé par écrit pour l'utilisation des dents extraites pour la recherche, qui a été examiné et approuvé par le comité d'éthique de l'Université de Fribourg (175/13).
Cavités d'accès standard ont été préparées et la longueur de la dent précise a été déterminée par l'insertion d'un ISO 10 K-file (VDW®, Munich, Allemagne) dans le canal jusqu'à ce que le dossier était visible au foramen apical. La pointe du fichier a ensuite été placé exactement au foramen apical de la dent pour mesurer la longueur de la dent. Longueur de travail (WL) a été fixé à 1 mm court de la longueur de la dent. Canaux radiculaires ont été préparés en utilisant les instruments de ProTaper (Dentsply®, Konstanz, Allemagne) selon les instructions du fabricant en combinaison avec un IT Professional Endo (VDW®, Munich, Allemagne) à 250 tours par minute. Pendant la préparation du canal radiculaire une solution d'hypochlorite de sodium à 3% a été utilisé pour l'irrigation [25]. préparation canalaire a été effectuée à l'aide des fichiers de mise en forme ProTaper S1 et S2 et la finition des fichiers F1 et F2. préparation apicale a été effectuée se terminant par fichier F2 ProTaper à WL. Un point gutta-percha ProTaper F2 a été fixé à WL et la région apicale était couverte de composite en utilisant Optibond FL (Kerr Corporation, Orange, CA, USA) et CeramX mono (Dentsply®, Konstanz, Allemagne) pour un scellement apical. Les dents ont été intégrées dans le méthacrylate (Techovit 4070 ™, Haereus Kulzer®, Wernheim, Allemagne) puis decoronated en utilisant un instrument de coupe rotatif de diamant (6830 de L.314.014, Gebr Brasseler GmbH & amp;. Co. KG, Lemgo, Allemagne) à 40.000 tours par minute à la jonction cément-émail. Après une irrigation finale avec l'hypochlorite de sodium à 3% et du thiosulfate de sodium à 5%, les dents ont ensuite été passées à l'autoclave à 134 ° C pendant 18 minutes. Pour vérifier que les canaux radiculaires étaient exempts de micro-organismes, des échantillons ont été prélevés sur les canaux radiculaires à l'aide de points de papier ProTaper F2 stériles. Pointes de papier mis en incubation dans le canal radiculaire pendant une minute, puis transférés dans un flacon contenant 750 ul de solution de Ringer stérile, vortexés pendant 30 secondes et 100 pi ont été cultivées sur une plaque de gélose au sang pendant 24 heures. Les dents avec une culture positive ont été exclus.
Remplissage du canal radiculaire et Retraitement
Les canaux radiculaires de 70 spécimens ont été remplis à l'aide d'une taille 25 Thermafil obturator (Dentsply®, Konstanz, Allemagne) en combinaison avec un scellant à base de résine époxy (AH plus, Dentsply®, Konstanz, Allemagne). Pour la décontamination des intercepteurs Thermafil ont été incubées dans un flacon avec une solution à 3% d'hypochlorite de sodium pendant 10 min [26]. Le scellant a été placé dans le troisième coronale du canal radiculaire avec un ProTaper F2 point de papier stérile. Chaque obturateur a été chauffé à l'aide d'un plus Four ThermaPrep (Dentsply®, Konstanz, Allemagne) jusqu'à ce qu'un signal sonore indique que l'obturateur était prêt pour le placement. Il a ensuite été insérée dans le canal radiculaire préparé avec un mouvement lent, ferme et continu dans la direction apicale. La poignée de chaque obturateur a été stabilisé au cours du refroidissement. Le transporteur n'a pas été coupé pour être en mesure de le retirer facilement. 2 radiographies ont été prises à partir de chaque échantillon, on bucco-linguales /palatines et une image mésiale-distale, pour assurer un remplissage complet du canal radiculaire.
Après 24 heures, les transporteurs ont été enlevés et le remplissage du canal radiculaire a été retiré en utilisant ProTaper D1 et instruments D2 jusqu'à la longueur de travail a été atteint en utilisant 5 × grossissement. Après le retrait du canal de remplissage 2 radiographies ont été prises à partir de chaque échantillon pour visualiser le matériau de remplissage de canal restant.
Après avoir retiré le canal radiculaire remplissant les spécimens ont été sectionnés en utilisant longitudinalement un diamant de coupe rotatif vu sous un jet d'eau. Les échantillons ont été stérilisés à l'aide stérilisation par plasma (H
2O 2). Après stérilisation les deux sections des spécimens ont été fixés les uns aux autres à l'aide d'un adhésif (Heliobond, Ivoclar Vivadent, Ellwangen, Allemagne).
Enterococcus faecalis
les canaux de racine de l'infection ont été infectées avec un isolat clinique de E. faecalis. E. faecalis
a été cultivé pendant une nuit dans bouillon de soja tryptique (TSB) (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA) à 36 ° C de 5 à 10% de CO 2 et seringue dans le canal radiculaire préparé en utilisant une aiguille de calibre 30 d'irrigation. des canaux de racines ont été infectées par E. faecalis
pendant 72 heures pour permettre la formation d'un biofilm. TSB a été changé toutes les 24 heures. Après 72 heures, les canaux radiculaires ont été rincés avec 5 ml de solution de Ringer stérile et un échantillon à l'aide de 3 points de papier ProTaper F2 stériles (Dentsply®, Konstanz, Allemagne) pour évaluer la présence de E. faecalis
dans les canaux radiculaires. Les points de papier ont été transférés dans 750 pl de solution de Ringer stérile. Les échantillons ont été mis en culture sur gélose au sang pour déterminer la présence de E. faecalis
dans les canaux radiculaires. 10 spécimens qui ont été pas root remplis et 10 spécimens avec des canaux radiculaires rechapés ont été laissés sans infection par E. faecalis
et ont servi de groupe témoin.
Après 72 heures, des échantillons ont été prélevés à l'aide des points de papier et de culture sur gélose au sang vérifier que les canaux radiculaires non infectés étaient exempts de micro-organismes.
Le traitement antimicrobien des infections primaires
Soixante échantillons avec des infections primaires ont été répartis au hasard en trois groupes. Dans le premier groupe (groupe PDT), les canaux radiculaires des 20 échantillons ont été traités par PDT (PACT200, Cumdente, Tübingen, Allemagne), qui se compose d'une source de lumière à 635 nm en combinaison avec le Endo photosensibilisant PACT-Fluid, un toluidine solution bleue à 13-15 mg /mL. PACT-Fluid Endo a été introduit dans le canal radiculaire en utilisant une aiguille de calibre 30. Après 60 secondes d'incubation, le Endo PACT-Fluid a été activé en utilisant la source de lumière PACT avec la pointe Guide PACT Lumière Endo, 100 mW LED source de lumière à 635 nm. La pointe Guide PACT Lumière Endo a été mis aussi près que possible WL et activé pendant 120 secondes selon les instructions du fabricant. Canaux radiculaires ont été rincés avec 5 ml de solution de Ringer pour éliminer la solution Endo PACT-Fluid, et échantillonnés avec 3 points de papier ProTaper F2 stériles. Pointes de papier ont été transférés dans 750 pi de solution de Ringer stérile, vortexés pendant 30 secondes et 100 ul ont été cultivées sur une plaque de gélose au sang et unités formant des colonies ont été comptées.
Dans le second groupe (groupe NaOCl), 20 des canaux radiculaires sont irriguées avec 10 ml de 3% de NaOCl avec un débit de 3-3,5 ml par minute. NaOCl a été éliminé par le rinçage des canaux radiculaires avec 2,5 ml de solution de Ringer stérile.
Dans le troisième groupe, 20 canaux radiculaires ont été traités avec de l'hypochlorite de sodium et (groupe NaOCl-PDT) PDT. Les canaux radiculaires sont rincées avec 10 ml d'hypochlorite de sodium à 3% en utilisant une aiguille d'irrigation de calibre 30 avec un débit de 3-3,5 ml par minute. hypochlorite de sodium en excès a été éliminé par l'irrigation avec 2,5 ml de solution de Ringer stérile et les canaux radiculaires ont été traités par PDT et échantillonnés selon le protocole du groupe PDT. Dans un groupe témoin, 10 canaux radiculaires ont été rincés avec 10 ml de solution de Ringer.
Traitement antimicrobien des infections secondaires
Pour le traitement antimicrobien des infections endodontiques secondaires, 70 spécimens ont été répartis au hasard en trois groupes. Dans le premier groupe (groupe PDT), 20 canaux radiculaires ont été traités par PDT (PACT, Cumdente, Tübingen, Allemagne) et échantillonnées selon le traitement du groupe PDT des infections primaires.
Dans le second groupe (groupe NaOCl) , 20 canaux radiculaires ont été irrigués avec 10 ml de 3% NaOCl avec un taux de 3-3,5 ml par minute. NaOCl a été éliminé par rinçage des canaux radiculaires avec 2,5 ml de solution de Ringer stérile.
Dans le troisième groupe (groupe NaOCl-HAP), 20 des canaux radiculaires ont été rincées avec 10 ml d'hypochlorite de sodium à 3% (NaOCl) à l'aide d'une jauge 30 aiguille d'irrigation avec un taux de 3-3,5 ml par minute. NaOCl a été éliminée par irrigation avec 2,5 ml de solution de Ringer stérile et un échantillon a été prélevé à l'aide de 3 points de papier ProTaper F2 stériles. Ensuite, les canaux radiculaires ont été traités par PDT et échantillonnés comme décrit ci-dessus.
Dans le groupe témoin, 10 canaux radiculaires ont été rincés avec 10 ml de solution de Ringer.
Après des échantillons de traitement antimicrobien ont été prélevés sur tous les échantillons en 3 stérile ProTaper F2 points de papier et transférés dans un flacon contenant 750 pi de solution de Ringer stérile pour déterminer les fractions de survie
. les échantillons ont été séparés à nouveau à l'aide d'un scalpel stérile et le reste de canal de remplissage sur les parois canalaires ont été recueillies au moyen d'un handfile stérile (VDW ®, Munich, Allemagne) dans un flacon contenant 5 ml de TSB et cultivées pendant une nuit. 100 pi des échantillons ont ensuite été cultivées sur une gélose au sang. fractions de survie des échantillons ont été calculées par comptage des unités formant des colonies. La microscopie électronique
à balayage (MEB)
Pour SEM spécimens examen des dents, des échantillons de Thermafil gutta-percha et AH Plus ont été préparés. Des échantillons de fraîchement mélangé AH Plus ont été fixés pour 24 heures. échantillons AH Plus et échantillons Thermafil ont été désinfectés en utilisant 70% d'éthanol. Les échantillons de dents ont été coupées verticalement en deux morceaux en utilisant une scie à diamant rotatif de coupe. sections de spécimens de dents ont été autoclaves à 134 ° C pendant 18 minutes. Les sections des dents d'échantillons et des échantillons de matériaux ont été infectées par E. faecalis
dans TSB pendant 72 heures à lamelles chambré (μ-Slide 8 bien, ibidi GmbH, Martinsried, Allemagne). Les échantillons de matériaux et les échantillons de dents ont été divisés en trois groupes. Les puits d'un groupe ne reçoivent pas un traitement antimicrobien et ont servi de contrôle. Dans deux des échantillons et des échantillons de matériaux ont été traités avec le groupe PACT-Fluid Endo pendant 1 minute et la source PACT Lumière pendant 1 minute. Dans le groupe trois spécimens et échantillons de matériaux ont été incubés avec 3% NaOCl pendant 1 minute. Après le traitement antimicrobien, les puits ont été rincés avec 1 ml de solution de Ringer stérile. Les échantillons et les échantillons ont été fixés dans 8% de formaldehyde pendant une nuit à 4 ° C et déshydraté dans de l'alcool gradué (30%, 50%, 70%, 80%, 90%, une fois chacune et deux fois à 99,8% pendant 1 heure). Puis séchage au point critique (point critique Sèche DPC 030; Bal-Tec, Wallruf, Allemagne) avec du dioxyde de carbone liquide a été réalisée selon la procédure standard. Les échantillons ont été pulvérisées avec de l'or dans une coucheuse IFL 050 (Bal-Tec) et examinées en utilisant un Zeiss Leo 435 VP microscope électronique à balayage (Leo Electron Microscopy Ltd. coopération Zeiss Leica, Cambridge, Angleterre), à 10 à 12 kV.
l'analyse statistique
une analyse unidirectionnelle de la variance (ANOVA) a été appliquée aux données afin d'évaluer l'effet de différentes techniques de traitement sur la réduction de E. faecalis
dans les canaux radiculaires. Le niveau de signification a été fixé à p & lt; 0,05
. Tous les tests statistiques ont été effectuées en utilisant SSPS (15,0)
. Résultats de l'effet des traitements antimicrobiens dans les infections primaires
La figure 1 montre âgé de 72 heures E. faecalis
biofilm. Moyenne E. faecalis
compte avant les traitements antimicrobiens étaient 2,32x10 6 UFC /ml. Figure micrographies électroniques 1 Numérisation de canal radiculaire dentine et les matériaux de remplissage des racines Thermafil gutta-percha et AH Plus colonisé avec E.faecalis à un grossissement de 5000 x. Les traitements à l'aide de 3% NaOCl ou PDT sévèrement réduire E. faecalis
sur la dentine et les surfaces des matériaux de remplissage du canal radiculaire. On a trouvé quelques cellules bactériennes en forme normale sur gutta-percha et AH Plus après les traitements. Restant cellules sur la dentine après les traitements ont montré une forme anormale.
Traitement des canaux radiculaires avec PDT seul a provoqué une réduction de la charge bactérienne, ce qui entraîne une destruction 92,7% de E. faecalis
. Le rinçage des canaux radiculaires avec 3% d'hypochlorite de sodium (NaOCl) ont obtenu une réduction de 99,9% et la combinaison de NaOCl à la désinfection et TPD réduit la viabilité bactérienne de 99,9%. L'irrigation avec l'hypochlorite de sodium à 3% et la combinaison de l'irrigation et de NaOCl HAP a entraîné une réduction significativement plus élevée de E. faecalis
par rapport à un traitement par TPD seul (p & lt; 0,0001). Après l'irrigation cas avec 3% NaOCl, 80% des canaux radiculaires étaient culture canaux négatifs. Le traitement supplémentaire en utilisant PDT a augmenté le nombre de canaux culture négatives à 90%. Lorsque les canaux radiculaires ont été traités avec PDT seul, 1 cas sur 20 (5%) était la culture négative (tableau 1) .Table 1 Réduction de E. faecalis après le traitement antimicrobien
Contamination par E. faecalis
UFC /ml × traitement de 106
contamination après traitement UFC /ml x pour la réduction de 106
E. faecalis
[%]
Culture échantillons négatifs [%]
moyenne
Std Dev
3% NaOCl
PDT
moyenne
Std Dev
primaire infection
2.48
2.04
X
-
0.0006
0.0003
99.9a
80
2.22
1.92
-
X
0.16
0.14
92.7b
5
2.13
1.86
X
X
0.0004
0.0003
99.9a
90
Secondary infection
2.24
1.76
X
-
0.0005
0.0001
99.9a
55
2.57
2.21
-
X
0.02
0.04
99.9a
0
2.26
1.58
X
X
0.001
0.001
99.9a
30
Pourcentage de la culture des échantillons négatifs. Les lettres en exposant indiquent les différences statistiques.
Effet des traitements antimicrobiens dans les infections secondaires
traitement antimicrobien des canaux radiculaires rechapés a provoqué une réduction significative de la charge bactérienne dans les trois groupes, ce qui entraîne une mortalité de 99,9% de E. faecalis
(tableau 1). irrigation NaOCl atteint culture négative canaux radiculaires dans 55% des cas, alors que dans les dents traitées par PDT aucun échantillon culture négative. Pour la combinaison de NaOCl irrigation et PDT 30% des cas ont été trouvés négatifs à la culture.
E. faecalis
isolé à partir du matériau de remplissage de canal
La figure 1 montre 72 heures vieux E. facealis
biofilm sur Thermafil gutta-percha et AH plus. Dans tous les groupes E. facealis
pourrait être cultivé à partir du matériau de remplissage isolé récupéré à partir des parois du canal radiculaire. Il y avait des quantités égales de CFU récupérées à partir du matériau de remplissage de racine échantillons avec HAP et la combinaison de l'irrigation NaOCl suivie par la PDT. niveaux CFU récupérées à partir du matériau de remplissage après NaOCl irrigation des canaux radiculaires étaient environ 10fold plus élevé par rapport à la PDT et la combinaison de NaOCl irrigation et PDT. Discussion de la
Dans la présente étude, PDT provoque une réduction de la viabilité bactérienne dans à la fois l'infection endodontique primaire et des canaux radiculaires rechapés infectés par E. faecalis
. Traitement des canaux radiculaires avec l'hypochlorite de sodium (NaOCl), PDT ou une combinaison de NaOCl irrigation et PDT a provoqué une réduction significative de E. faecalis
dans les canaux radiculaires. Dans les cas d'infections primaires, la combinaison de NaOCl l'irrigation et l'irrigation PDT NaOCl a obtenu le plus grand nombre de culture négative canaux radiculaires (90%), l'irrigation NaOCl seuls canaux radiculaires de culture négative obtenus dans 80%, tandis que, après traitement à l'aide PDT seulement un spécimen a été culture négative. Pour les infections secondaires, l'irrigation NaOCl a obtenu le plus grand nombre de culture négative canaux radiculaires, alors qu'après traitement par PDT tous les échantillons étaient positifs à la culture. Garcez et al. [24] ont étudié l'effet de la PDT dans retraitements endodontiques in vivo. Ils ont constaté que la PDT comme un adjuvant pour un traitement endodontique classique conduit à une réduction supplémentaire significative de la charge bactérienne après l'irrigation à l'aide de NaOCl, le peroxyde d'hydrogène et de l'EDTA et est efficace contre les bactéries multirésistantes. Sur la base de ces résultats, PDT est censé avoir un effet antimicrobien supplémentaire après l'irrigation du canal radiculaire, en particulier sur les micro-organismes résistants. Les résultats de la présente étude ne peuvent pas confirmer ces résultats dans les cas de retraitements. Microorganismes pourraient être en mesure d'envahir dentine et tubules couverts par un matériau de remplissage de canal radiculaire et peuvent ne pas être accessibles pour les agents ou composants PDT désinfection. Aussi, irrigularities en forme de canaux radiculaires, les nageoires et les tubules dentinaires pourraient limiter la diffusion de NaOCl ou le photosensibilisant, l'oxygène et de la lumière. Le matériau de remplissage de canal restant peut abriter des micro-organismes qui rend impossible pour des solutions d'irrigation, le photosensibilisant et la lumière de pénétrer. La lumière émise peut être absorbée ou réfléchie par les résidus du canal radiculaire matériau de remplissage limitant l'effet de la PDT. Toutefois, dans la présente étude du canal radiculaire isolée du matériau de remplissage montre une contamination inférieure avec E. faecalis
après le traitement par PDT et la combinaison de NaOCl irrigation et PDT par rapport à l'irrigation NaOCl. Le photosensibilisateur aurait pénétré ces zones de matériau de remplissage adhère à la paroi du canal radiculaire mieux que NaOCl ou NaOCl est inactivé quand il est en contact avec E.faecalis
ou sa structure des composants du biofilm-like [27]. Le
la résistance des micro-organismes organisés en biofilm a été décrit précédemment [28]. Les bactéries présentes dans les couches profondes de biofilm sont plus résistants en raison de la limitation de la diffusion (photosensibilisateur, de l'oxygène ou de la lumière ou de l'agent d'irrigation) à travers la structure organique [29]. En outre, des composés organiques, tels que des cellules mortes ou biofilm matrice extracellulaire neutralisent les agents antimicrobiens. Des études antérieures ont suggéré d'utiliser PDT comme traitement adjuvant à l'irrigation dans le canal radiculaire de désinfection [21-23, 30]. Les auteurs ont trouvé des protocoles d'irrigation à base de NaOCl, le peroxyde d'hydrogène et de chélateurs, comme l'EDTA, d'être supérieure dans le traitement antimicrobien endodontique, notamment en termes de biofilm désintégration. Cependant, Garcez et al. [30] a démontré un effet supplémentaire de PDT après un traitement classique et a trouvé E. faecalis
être 100-1000 fois plus sensibles à la PDT tuer médiée par rapport aux espèces Gram-négatives [31]. L'effet antimicrobien inférieure de PDT par rapport à l'irrigation peut être expliquée par les cellules mortes et les restes de cellules qui restent dans le canal radiculaire, sur la paroi du canal ou peuvent encore être intégrées dans la structure du biofilm comme la neutralisation de la mise à mort médiée PDT, de sorte que la photosensibilisant, l'oxygène et la lumière peuvent ne pas atteindre les bactéries dans les couches profondes. Irrigation élimine les cellules mortes et les restes.
Dans la présente étude, un modèle d'infection monospécifique avec un isolat clinique de E. faecalis
a été utilisé. E. faecalis
a souvent été trouvé dans les infections primaires et secondaires le plus important des systèmes de canal [32, 33]. E. faecalis
a été montré pour être très résistant aux agents désinfectants et des antibiotiques [32]. E. faecalis
peut effectivement être colonisé, il se forme un biofilm sur les racines parois du canal et envahit tubules dentinaires [34-36]. Ce modèle a été utilisé pour mono-infection reproduire la même structure de biofilm comme dans chaque canal radiculaire des spécimens d'une espèce qui est connu pour être difficile à éliminer par chimio-mécanique débridement [32]. Cependant, les infections du canal radiculaire sont souvent associées à de multiples espèces [27, 37]. Les échantillons d'un biofilm avec plusieurs espèces peut varier dans le contenu des micro-organismes dans chaque échantillon qui pourraient nuire à l'effet de la désinfection [27]. des canaux radiculaires ont été prises avec des pointes de papier ProTaper F2 stériles. points de papier ne prennent une partie des bactéries de la paroi du canal radiculaire. Cette méthode d'échantillonnage sous-estimer les niveaux d'UFC dans les canaux radiculaires avant et après le traitement et ne donne pas le total E. faecalis
chiffres pour chaque échantillon. Un échantillon de culture négative ne signifie pas un canal de racine stérile. Pour tous les échantillons de points de papier ProTaper F2 ont été utilisées. Ces points de papier ont la même grandeur de surface et parfaitement dans le canal radiculaire préparé pour l'échantillonnage et cette méthode a été utilisée dans des études antérieures [24, 29, 32]. Les techniques moléculaires, comme les techniques de PCR, sont souvent utilisés pour détecter les micro-organismes dans les canaux radiculaires [37, 38]. Mais dans la présente étude, il était important de faire la différence entre la vie (cultivable) et mort (non cultivable) bactéries. Les techniques moléculaires auraient conduit à des résultats faussement positifs lorsque les restes de cellules et l'ADN sont laissés dans le canal radiculaire après le traitement antimicrobien, surestimant la contamination restante du canal radiculaire. Cette surestimation aurait été plus élevé pour les spécimens traités par PDT par rapport à l'irrigation, parce que l'irrigation va supprimer un grand nombre de cellules mortes et les restes de cellules. Par conséquent, un deuxième échantillon a été prélevé après le traitement antimicrobien en utilisant une lime K stérile pour éliminer les copeaux de dentine de la paroi du canal radiculaire. De cette manière, la contamination résiduelle de la paroi du canal de racine et tubules a été évaluée. Cela limite la sous-estimation de la contamination bactérienne par échantillonnage en utilisant des points de papier.
Souza et al. [29] infectés canaux radiculaires avant le façonnage. procédures d'instrumentation et d'irrigation provoquent un stress supplémentaire sur les micro-organismes et de perturber le biofilm. Il a été démontré que l'instrumentation canalaire permet de réduire considérablement les bactéries dans les canaux radiculaires [39, 40]. Dans la présente étude, PDT a été testé dans des canaux radiculaires complètement en forme et dans le cas du retraitement endodontique après le remplissage du canal radiculaire et le retrait du remplissage du canal radiculaire. Cela n'imite pas la situation clinique. Ces spécimens ont ensuite été infectées avec un isolat clinique de E. faecalis
. Dans les 72 heures suivant l'infection, E. faecalis
a pu former une structure de biofilm-like et l'effet des différents traitements antimicrobiens sur E. faecalis
dans les canaux radiculaires pourrait être étudiée.
Conclusion
PDT réduit E. faecalis
dans les infections primaires infectées et se retira des canaux radiculaires. Toutefois, l'irrigation avec de l'hypochlorite de sodium à 3% est plus efficace pour éliminer En.faecalis
par rapport à la PDT. PDT a pu éliminer E. faecalis
de rester canal radiculaire matériau de remplissage sur le mur de canal plus efficace par rapport à 3% NaOCl. PDT est pas une alternative, mais un complément efficace dans la désinfection du canal radiculaire, en particulier dans les cas de retraitements. Déclarations de perturbation du biofilm avant PDT et l'utilisation d'un complément d'hypochlorite de sodium à base approche conventionnelle restent obligatoires.
Accusé
Les auteurs remercient le Dr Susanne Stampf et Kirstin Vach (Institut de Biométrie médicale et informatique médicale Tous les auteurs ont lu et approuvé le manuscrit final.
