RÉSUMÉ
Le but de cette étude était d'utiliser un dosage immuno-enzymatique pour déterminer si la diffusion de la tétracycline se produit à travers la dentine de la racine des dents humaines extraites. Vingt et un des racines ont été préparées mécaniquement, puis divisés en trois groupes: expérimental (G1; n = 15; tétracycline imprégné gutta-percha (TGP) avec MCS scellant); contrôle négatif (G2; n = 3; plaine gutta-percha avec MCS scellant) et le contrôle MCS (G4; n = 3; TGP sans scellant). Toutes les racines ont été scellées et coronale ensuite immergées dans une solution saline. Trois échantillons supplémentaires ont été utilisés comme témoin positif (G3; n = 3, l'un sans TGP cône n solution saline). Les résultats ont montré significativement plus la diffusion de la tétracycline entre le groupe 3 et tous les autres groupes. Il n'y avait pas de différence significative entre les groupes 1, 2 et 4. diffusion maximale a été vu à 24 heures, cependant, le taux de diffusion a déposé de manière significative. Les dents obturées avec TGP et MCS scellant ne montrent pas la diffusion de la tétracycline au-dessus d'une moyenne de 0,006 g /ml dans les délais testés.
Chemins de transmission de la maladie entre le parodonte et le système de canal peut se produire par le brevet canaux latéraux et accessoires, tubules ou formamina.1 apical Simon et al. (1972) a proposé une classification des lésions endodontique-parodontie et a suggéré que le traitement de ces dents exigent à la fois traitement.2 endodontique et parodontie Comme traitement endodontique est très efficace lorsqu'elle est effectuée correctement, le pronostic dépend généralement de la quantité de support osseux perdu de la accompagnant la parodontite et la capacité de traitement parodontal pour résoudre le defect.3 résiduel thérapie parodontale peut inclure débridement complet de la racine, l'administration systémique ou locale d'antibiotiques et des antiseptiques, la résection de la racine, la thérapie régénérative ou éruption forcée.
systémique et locale tetracycline délivré a été largement utilisé dans le traitement de divers types de maladies parodontales qui sont refractory.4 Il possède un large spectre d'activité contre de nombreuses bactéries gram-positives et gram-négatives. livraison systémique de la tétracycline tend à se concentrer dans les os et les dents en raison de sa capacité à se lier à des matrices dentinaires minéralisées et sa libération lente de dentine fait son effet antimicrobien de fond. Des doses répétées de tetracylcine par voie orale ont été trouvées pour atteindre les niveaux de fluide gingival qui sont deux à quatre fois celui des niveaux sanguins, créant ainsi un réservoir au-dessus de la concentration minimale inhibitrice pour la plupart des bactéries pathogènes trouvés dans la
orale cavity.4-6
de plus, la tetracycline, à la différence de la plupart des antibiotiques alcalino-terreux, est stable dans des environnements acides et reste efficace dans tissue.7 périradiculaire enflammée tetracycline a également été trouvé pour inhiber l'activité de la collagénase et ainsi la résorption osseuse.
largement utilisé localement fibre parodontale livré imprégné de tétracycline est Actisite (Alza Corp., Palo Alto, CA). Ces fibres sont insérées sous la gencive dans les poches parodontales pour augmenter davantage les concentrations dans le fluide gingival et peuvent supporter des concentrations supérieures à 1300 g /ml pendant 10 jours, 5 une concentration qui est bien au-delà de la concentration minimale inhibitrice (CMI) gamme de 0.016- 2,000 g /ml nécessaire pour inhiber la croissance de 90 pour cent des parodontaux et endodontiques agents pathogènes dans les études de vitro.8 montrer que la thérapie combinée de détartrage et surfaçage radiculaire ainsi que la tétracycline fibres entraîne beaucoup moins de sites de progression de la maladie après un an de suivi par rapport à l'échelle et surfaçage radiculaire alone.9 en outre, la distribution locale de la tétracycline minimise le potentiel de développement de médicaments resistance.10
du point de vue endodontique, contenant iodoform-gutta percha, MGP (Lone Star Technologies, Westport, CT) et plus récemment, la tétracycline imprégné gutta percha (TGP), (Medidenta international Inc., Woodside, NY) ont été brevetées par le Dr Howard Martin afin de prévenir la contamination bactérienne après traitement7 endodontique (Fig. 1). En outre, le Dr Martin recommande d'utiliser son TGP en combinaison avec son breveté d'oxyde de zinc eugénol scellant contenant de l'iodoforme, MCS, (technologies de Lone Star, Westport, CT) lorsque obturant les dents avec de longue date infections.11
Des études ont montré que de nombreuses techniques d'application de scellant ne parviennent à couvrir 25% à 75% du canal walls.12 en outre, les scellants ont été montré pour résorber une exposition prolongée à des tissus fluid.13 Il est donc probable que les portails de sortie restent brevets à travers laquelle parodontale et les tissus périapicaux peuvent entrer en contact direct avec TGP. Cette source d'humidité serait théoriquement activer TGP et provoquer la libération de la tétracycline. La tetracycline alors diffuse à travers et se lie aux canaux latéraux ou tubules d'agir comme un réservoir de fond tetracycline.7
La capacité de tetracycline Compte tenu de diffuser à travers et se lient à la dentine, 7 TGP peut avoir le potentiel d'être utilisé comme un nouveau système d'administration locale de médicaments dans des situations cliniques nécessitant à la fois un traitement endodontique et parodontale.
Le but de cette étude était d'utiliser un dosage immuno-enzymatique pour déterminer si la diffusion de la tétracycline se produit à travers la dentine de la racine des dents humaines extraites obturées avec TGP et MCS scellant
MATERIELS eT METHODES
Phase 1:. préparation des échantillons et de l'échantillon de solution saline collection
Vingt et une des dents humaines récemment extraites ont été sélectionnés pour l'étude et stockée dans l'eau du robinet. Les dents ont varié dans le type de centrales à deuxièmes molaires. Les couronnes ont été enlevées, toutes les lésions carieuses ont été éliminées et les dents multiples racines ont été sectionnés dans les racines simples. Aucune tentative n'a été faite pour préserver le ligament parodontal. Toutes les racines individuelles ont été modifiées à l'aspect coronal pour créer des spécimens 13mm racines (figures 2A & amp;. B). Tous les échantillons ont été autoclaves pendant 30 minutes à 250F à 15 PSI avant le nettoyage et le façonnage. Un opérateur préparé chaque instrumentation rotative utilisant l'échantillon aseptique avec 0,6 cône série Profil 29 (Dentsply Tulsa Dental, États-Unis). Le foramen apical a été élargie à 0.35mm. Cinq ml d'hypochlorite de sodium à 6,0% a été utilisé tout au long de la procédure de nettoyage et de mise en forme. Dix-sept pour cent de l'EDTA a été autorisé à tremper pendant une minute dans tous les canaux préparés pour enlever la couche de frottis. Tous les canaux ont été séchés avec du papier et des points répartis au hasard dans les groupes expérimentaux et de contrôle. Tous les échantillons ont été obturés en utilisant la condensation latérale à froid.
Le groupe expérimental (G1) est composée de 15 spécimens qui ont été obturées avec de la tétracycline imprégné gutta percha (TGP) et MCS scellant. Groupe deux (G2) est le contrôle négatif et composé de trois spécimens qui ont été obturée à l'aide non-médicamenteux gutta percha et MCS scellant. Groupe 3 (G3) est le contrôle positif et se composait de trois cônes TGP autoportantes. Dans le groupe de quatre (G4), trois spécimens ont été obturés en utilisant TGP sans scellant. L'aspect coronal de tous les échantillons de racines ont été conditionnées avec un gel à 37% d'acide phosphorique (Gel de mordançage, Kerr, Orange, CA) pendant 15 secondes, bien rincés pendant cinq secondes et légèrement séchées par soufflage d'air doux. OptiBond SOLO (Kerr, Orange, CA) système de liaison a été appliqué selon les instructions et la lumière du fabricant durcis pendant 20 secondes. Charisma matériau de restauration (Heraeus-Kulzer, Hanau, Allemagne), l'ombre A3, a ensuite été appliqué par étapes à la surface liée et de la lumière durcie pendant 40 secondes après chaque incrément.
échantillons Après obturation, G1, G2 et G4 ont été immédiatement stockés dans 100% d'humidité pendant 24 heures et ensuite transférés dans des tubes à essai 15ml plastique étiquetés individuellement, scellés et stérilisés remplis de 10ml de solution stérile saline à 0,9%. A ce moment, G3 cônes TGP autoportants ont été placées dans leurs tubes à essais individuels remplis de 10 ml de solution stérile saline à 0,9%. Tous les tubes à essai ont été enveloppés dans du papier d'aluminium pour minimiser l'exposition à la lumière. Les tubes ont ensuite été placés dans un incubateur à 37 ° C pendant des intervalles de temps spécifiques. 24 h, 48 h, 96 h, 1 semaine et 4 semaines
A la fin de chaque intervalle de temps, les deux échantillons d'essai et témoins ont été éliminés de leurs tubes contenant de la solution saline et les tubes ont été reconditionnés en aluminium et stockés dans le congélateur. Tous les échantillons ont ensuite été placés dans de nouveaux tubes à essai 15ml en plastique étiquetés individuellement scellés et stérilisés remplis de 10ml de frais, stérile à 0,9% de solution saline. L'aluminium a été utilisé à nouveau pour envelopper chaque tube. Tous les nouveaux tubes ont été à nouveau placés dans l'incubateur jusqu'à ce que le prochain intervalle de temps à l'étude au cours de laquelle ce processus a été répété ..
Phase 2: Ridascreen tétracycline compétitive ELISA (R-Biopharm Inc, South Marshall , MI)
une étude pilote a été complétée en premier lieu afin de déterminer ce que la dilution de chaque essai et l'échantillon témoin de solution saline a été nécessaire pour produire une concentration comprise entre 0,15 et 1,35 g /kg ou parties par milliard (ppb). Cette gamme de concentrations correspond à la partie linéaire de la courbe d'étalonnage représentée sur le graphique 1. Une série de concentrés de tetracycline standard de 0, 0,05, 0,15, 0,45, 1,35 et 4,05 ppb dans une solution tampon (fourni dans le kit Ridacreen tetracycline) sont utilisés pour produire la courbe d'étalonnage. Les concentrés standards sont exécutés avec tout le samples.14
Chaque kit Ridascreen contient 96 puits de microtitrage avec un échantillon par puits. Chaque échantillon est testé en double. Quatre kits Ridascreen ont été utilisés au total et les puits ont été disposés dans les supports de microtitrage fournis. Cinquante l de standard, des échantillons expérimentaux et de contrôle ont été ajoutés à chaque puits. Cinquante litres d'une solution d'anticorps anti-tétracycline a ensuite été ajouté à chaque puits et les solutions ont été mélangées doucement et on laisse reposer pendant une heure à température ambiante. Au bout d'une heure, on a versé la solution sur chaque puits, et la totalité du liquide résiduel a été éliminé en tapotant les porteurs de microtitration à l'envers sur une serviette en papier. Les puits ont ensuite été lavés avec du tampon PBS avec du Tween. Une centaine de litres de conjugué enzymatique a ensuite été ajouté et mélangé doucement. Cette solution a été laissée au repos pendant 15 minutes à température ambiante. Après 15 minutes, les solutions ont été de nouveau versé, et tout liquide résiduel a été éliminé en tapotant les détenteurs de micropuits à l'envers sur une serviette en papier. Les puits ont été à nouveau lavées avec du tampon PBS avec du Tween et 50l de chromogène a été ajouté à chaque puits. Les puits ont été délicatement mélangés et laissés reposer pendant 15 minutes dans l'obscurité. Au bout de 15 minutes, 100 pi de réactif d'arrêt 1N d'acide sulfurique ont été ajoutés et mélangés doucement. L'absorbance a été mesurée à 450 nm en utilisant un spectrophotomètre de plaque de microtitrage et elle est inversement proportionnelle à la concentration de tetracycline dans les standards ou échantillons. Un vide d'air a été utilisé pour la comparaison. L'absorbance a été lue dans les 60 minutes après l'ajout du réactif d'arrêt. La concentration de tetracycline en g /kg dans chaque échantillon a été ensuite lu à partir de la courbe d'étalonnage en utilisant les valeurs moyennes d'absorbance obtenues. La concentration réelle de la tétracycline dans chaque échantillon a également été multiplié par un facteur de dilution correspondant et converti en g /ml.14
ANALYSE STATISTIQUE
Les données ont été collectées et stockées dans un programme de tableur et codé pour analyses statistiques. calcul des données a été préformé en utilisant SYSTAT v11 pour Windows (SYSTAT Software, Inc, Point Richmond, CA). Les deux statistiques descriptives et deux facteurs ANOVA ont été effectuées.
Les tableaux de RÉSULTATS 1 à 4 concentrations show de diffusion pour la tétracycline dans tous les échantillons pour chaque groupe et à chaque intervalle de temps. À un niveau alpha de 0,05, les résultats de deux facteurs ANOVA ont indiqué que, pour chaque intervalle de temps étudiés, seul le témoin positif, G3, a eu une diffusion significative à la tetracycline, (28.486g /ml) par rapport au expérimental (G1: 0,006 g /ml) et d'autres groupes de commande (G4: 0,075 g /ml, G2: 0.000g /ml). La différence dans les concentrations de diffusion de la tetracycline pour G1, G2 et G4 ne sont pas significatives (Tableau 5, tableau 6 & amp; graphique 2). Lorsque la concentration de la tetracycline a été évaluée dans le temps, on a constaté que la diffusion maximale de la tetracycline a eu lieu à 24 heures (17.190g /ml). Diffusion a chuté à un minimum à 96 heures (2.676g /ml) et a fortement augmenté de 4 semaines (6.860g /ml) (tableau 7, graphique 3)
.
DISCUSSION
Livraison locale la tétracycline et ses dérivés sont utilisés depuis longtemps en tant que thérapie adjuvante dans le traitement de divers types de parodontite. Parodontite associatied avec des lésions endodontiques présente une situation unique où le système de canal peut être utilisé pour délivrer localement un antimicrobien efficace pour le parodonte via différentes voies de brevets tels que tubules ou les canaux latéraux. Tant le placement d'un médicament intra-nomination ou l'obturation finale sont des occasions de fournir une délivrance locale d'un médicament.
La présente étude a été le premier à utiliser un dosage immuno-enzymatique, Ridacreen Tetracyclin (R-Biopharm Inc.), afin de déterminer si la diffusion de la tétracycline se produit à travers la dentine de la racine des dents humaines extraites lorsque obturé avec TGP, MCS scellant et coronale scellé. Dans le passé, des auteurs tels que Wikesjo et coll.15 et Ciarlone et al16 utilisés tetracycline radioactifs et scintillation liquide comptant pour quantifier la quantité de tétracycline libéré de la dentine.
immunoessais enzymatiques sont fréquemment utilisés dans la recherche dentaire pour quantifier diverses molécules telles comme cytokines17 pro-inflammatoire ou endogène bêta-endorphin.18
Ridacreen Tetracyclin est un dosage immuno-enzymatique disponible dans le commerce. Il est couramment utilisé pour détecter les résidus de tétracycline dans des échantillons de viande, le lait, le miel et l'eau que cet antibiotique, entre autres, est utilisé comme un supplément dans l'alimentation des animaux pour accélérer la croissance de production alimentaire livestock.19 Selon le fabricant, cette enzyme immunologique peut détecter des concentrations aussi faibles que 0,5 x 10-5 g /ml.14
tétracycline est également connu pour présenter photodegradation.20 pour minimiser son échec moléculaire, la tétracycline diffuse dans tous les échantillons de sérum physiologique a été protégé contre une éventuelle tétracycline sources de lumière en enveloppant individuellement chaque tube d'échantillon avec une feuille d'aluminium.
tétracycline est également connu pour décomposer lorsqu'il est dissous dans divers liquids.10 Ainsi, la concentration de tétracycline détectée dans le groupe expérimental et le contrôle des solutions salines peuvent avoir été inactifs biologique des fragments de molécules parentes tetraciclyine. Dans une tentative pour empêcher ou au moins retarder cet événement, les experts de R-Biopharm Inc. a recommandé que tous les échantillons soient immédiatement congelés. En dehors de la diffusion effective des molécules complètes ou partielles à la tetracycline en solution, l'efficacité antimicrobienne de la tetracycline ne peut pas être diffusé acertained basée sur les résultats de cette étude. Des recherches supplémentaires seraient nécessaires pour confirmer l'effet antibactérien de la tétracycline diffuse.
TGP et MGP bras gutta-percha avec un large spectre d'efficacité antibactérienne. Cela est pertinent dans les situations où les fuites coronale après obturation, conduisant à la contamination et la réinfection bactérienne. Alternativement, TGP et MGP, pourraient offrir une résistance contre les bactéries résiduelles laissées dans le système de canal qui, autrement, produire la contamination disease.17 d'humidité persistante est censé activer la tétracycline et l'iode de TGP et MGP respectively.21,7 Melker et al (2006) trouvé TGP être supérieur à la fois pop et régulière gutta percha contre les bactéries communément trouvées en omettant les traitements de canal, y compris E.faecalis.22 en outre, le Dr Martin suggère d'utiliser un tétracycline imprégné produit iodoform combiné /ou TGP avec MCS scellant dans le traitement des dents avec de longue date infections.11 Cette dernière recommandation a été prise en compte lors de la conception de l'étude. Malgré les effets bénéfiques immédiats de MGP, une étude récente a révélé que MGP ne pouvait pas maintenir ses propriétés antimicrobiennes et les effets antifongiques après 48 et 72 hours.23
tétracycline a été largement utilisé dans le traitement de divers types de maladies parodontales sont de nature réfractaire et elle a également été jugée efficace pour tuer Actinobacillus actinomycetemcomitans, habituellement associée à des chercheurs de periodontitis.4 agressifs tels que Rosenblatt (1986) en question l'efficacité antimicrobienne de tetracycline contre les agents pathogènes parodontaux communs, en raison du développement de divers degrés de la résistance à gram-positives et organismes anaerobes.24 Malgré cette affirmation, Walker et al. (1979) ont trouvé la tétracycline d'avoir une efficacité antimicrobienne significative contre la plupart des bactéries isolées à partir de pockets.25 parodontale humaine Parmi ceux-ci étaient Actinobacillus actinomycetemcomitans, Campylobnacter orale, et les espèces Streptococcus avec des concentrations minimales inhibitrices dans les milieux d'agar sous 2m /ml. Plus récemment, Colombo et al (2003) a conclu que l'utilisation des deux tétracycline systémique et fournis localement réduit de manière significative le nombre de bactéries "complexes rouge" pendant au moins six mois après treatment.26
La capacité de tétracycline à diffuser à travers et se lient à la dentine était clairement manifeste dans plusieurs échantillons de racines à la fin de l'étude. Figures 2A & amp; B représentent un échantillon de G4 (contrôle MCS) avec dentine nettement jaune par rapport à un échantillon de G2 (contrôle négatif). Plusieurs études ont porté sur la liaison de la tétracycline à la dentine. Les molécules de traçage de l'dimethychlortetracycline antibiotique tétracycline connexes contenues dans Ledermix (Lederle Pharmaceuticals, Wolfratshausen, Allemagne), a été retrouvé à passer à travers la dentine des dents monoradiculées. À la fois le retrait de la couche de boue dentinaire et le cément, ont été trouvés pour augmenter la diffusion du molecules.27 traceur Par conséquent, le placement intracanalaire immédiat de Ledermix en dents replanté a été démontré entraîner statistiquement significativement plus guérison et moins résorption externe par rapport à l'hydroxyde de calcium. 28
dans cette étude, la quantité de tétracycline diffuse à travers ses dents obturées avec TGP et MCS scellant était statistiquement non significatif par rapport à autoportant TGP dans une solution saline (le contrôle positif; G3). Selon l'étude, la CMI de tétracycline peut être interprétée comme allant de 0,016 g /ml à 2,00 g /ml, tel que déterminé par Kleinfelder (1999) ou à partir de 4g /ml à 8g /ml, tel qu'enregistré par Walker et al (1981 ) .8,29 Basé sur la gamme rapportée par Kleinfelder (1999), les dents obturées avec TGP et sans MCS scellant (la commande MCS; G4) et autonome TGP (témoin positif; G3) ont eu une diffusion moyenne de la tétracycline qui est tombé à l'intérieur ou dessus de la plage MIC; respectivement. Cependant, la gamme supérieure rapporté par Walker et al (1980), cela signifierait que autoportant TGP dans une solution saline (contrôle positif; G3) produit une concentration moyenne de tetracylcine diffuse qui serait suffisamment antibactérien. Néanmoins, la quantité de diffusion de la tétracycline de dents obturées avec TGP et MCS scellant (le groupe expérimental; G1) est tombé bien au-dessous les deux gammes MIC documentées pour la tétracycline
Le taux de diffusion de la tétracycline à travers le temps a diminué de façon exponentielle à partir de 0 heures. à 96 heures. Ces résultats sont similaires à ceux enregistrés pour le taux de diffusion à travers la dentine de dimethychlortetracycline de Ledermix utilisé comme agent de coiffage pulpaire indirect dans une étude réalisée par Abbott et al (1989), où le taux de diffusion de pointe était à 2 hours.29 Le augmentation observée de la concentration de la tétracycline à partir de 96 heures à deux semaines est probablement due à son accumulation dans la solution à partir des intervalles de temps plus longs choisis pour cette étude et non en raison d'une éventuelle réactivation des points médicamenteux. Une telle accumulation ne serait pas susceptible in vivo, où le fluide gingival est dans un état constant de flux.
Sur la base des résultats de cette étude, l'obturation in vitro de dents avec TGP et MCS scellant ne permettre une diffusion suffisante de la tétracycline, tel que déterminé par le Ridacreen Tetracyclin, qui est compatible avec des concentrations minimales inhibitrices connues.
les recherches futures de ce produit doit examiner s'il y a un certain avantage à l'utilisation de points TGP pré-imbibés activées comme médicament intra-rendez-vous pendant traitement de canal contre les deux agents pathogènes endodontiques et parodontales au sein du système de canal et le parodonte environnant.
Dr. Mary Dabuleanu est en pratique privée limitée à endodontie à Toronto, ON. Gabriel J. Faubert est le directeur régional et directeur des ventes senior chez R-Biopharm Inc. Dr John Molinari est le professeur et président du Département des sciences biomédicales, Université de Detroit, Mercy. Dr. Frank E. Rose était auparavant professeur de dentisterie restauratrice et de bureau de doyen associé de l'éducation supérieure et de la Recherche, président du département de dentisterie restauratrice et président de la Commission de révision institutionnelle, Université de Detroit, Mercy. Il est actuellement en pratique privée à Manistique, MI. Dr. Michael Hoen est le professeur associé et directeur Graduate Program, Département d'endodontie, Université de Detroit, Mercy. Dr. W. Choong Foong est le professeur agrégé, Département des sciences biomédicales, Université de Detroit, Mercy.
Nous tenons à remercier R-Biopharm, Inc. pour leur soutien technique et Medidenta internationale pour leur généreux don de tétracycline gutta-percha (TGP) et MCS root Canal Sealer.
Santé bucco-dentaire se félicite de cet article original.
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Tableau 1
G1:. Groupe
Experimental
24 heures (g /ml), 48 heures (g /ml) 96 heures (g /ml) 1 semaine (g /ml) 1 mois (g /ml) de N cases1515151515Minimum0.0000.0000.0000.0000.000Maximum0.0000.0000.0060.0080.087Mean0.0000.0000.0000.0020.026Standard Dev0.0000.0000.0010.0030.029
Tableau 2
G2: contrôle négatif
24 heures (g /ml) 48 heures (g /ml) 96 heures (g /ml) 1 semaine (g /ml) 1 mois (g /ml) de N cases33333Minimum0.0000.0000.0000.0000.000Maximum0.0000.0000.0000.0000.000Mean0.0000.0000.0000.0000.000Standard Dev0.0000.0000.0000.0000.000
Tableau 3
G3: contrôle positif
24 heures (g /ml) 48 heures (g /ml) 96 heures (g /ml) 1 semaine (g /ml) 1 mois (g /ml) de N cases33333Minimum58.40018.3507.46613.18021.831Maximum85.64024.08015.83914.54030.901Mean68.76022.00010.68413.87727.107Standard Dev14.7443.1714.5100.6814.713
Tableau 4
G4: Contrôle MCS
24 heures (g /ml) 48 heures (g /ml) 96 heures (g /ml) 1 semaine (g /ml) 1 mois (g /ml) de N cases33333Minimum0.0000.0000.0060.0270.214Maximum0.0000.0110.0330.0570.408Mean0.0000.0040.0180.0450.308Standard Dev0.0000.0070.0140.0160.097
Tableau 5
Dep Var: g /ml N: 120 Multiple R: 0,985 Squared R multiple: 0.970
SourceSum-of-SquaresdfMean-SquareF-ratiop-valueGroup10639.09633546.365655.5800Time2056.3174514.07995.0330Group*Time5766.76912480.56488.8370Error540.9511005.410
Table 6
moindres carrés
GroupLS moyenne (g /ml) Npoint /sealer0.00675Point /non sealer0.07515Positive control28.48615Negative control0.00015
Tableau 7
periodLS temps moyen (g /ml) N24 hours17.1902448 hours5.5012496 hours2.676241 week3.481241 month6.86024